[发明专利]一种基于两端锁定DNA酶的分子信标识别miRNA新方法在审
| 申请号： | 201710072705.8 | 申请日： | 2017-02-10 |
| 公开（公告）号： | CN106868118A | 公开（公告）日： | 2017-06-20 |
| 发明（设计）人： | 许淑霞;张后春;李显明;张信凤 | 申请（专利权）人： | 成都理工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 610059 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 建立了一种低背景、无标记、高灵敏度识别miRNAs的化学发光新方法，通过阻断DNA链预先封闭探针DNA链上的富G适配体序列两端封闭，阻止分子间和分子内的G‑四联体DNA酶的形成，引入的目标miRNA，通过互补配对置换出阻断DNA链，激活富G适配体序并形成高催化活性的分子内G‑四联体DNA酶催化化学发光，实现特异识别miRNA。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 两端 锁定 dna 分子 信标 识别 mirna 新方法 | ||
【主权项】：
一种基于两端锁定DNA酶的分子信标识别miRNA新方法，其特征在于包括以下四个步骤：(1)将500pM探针DNA与1000pM阻断DNA在HEPES缓冲中孵育一个小时。(2)在(1)所述的混合溶液中加入目标miRNA‑21继续孵育3个小时；(3)在(2)所述的混合溶液中加入2.5nM氯化血红素继续孵育半个小时；(4)取(3)所述的溶液100uL，加入50uL 2μM的鲁米诺溶液和50uL20mM H2O2溶液，用化学发光仪检测化学发光信号，分析其测定结果。
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