[发明专利]一种全人源化EGFRvIII嵌合抗原受体T细胞及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201710054603.3 申请日: 2017-01-24
公开(公告)号: CN106636003B 公开(公告)日: 2019-07-12
发明(设计)人: 栗红建;何昱;余祥;姜冬冬;孟邑芳 申请(专利权)人: 深圳普瑞金生物药业有限公司;普瑞金(深圳)生物技术有限公司
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N15/867;C12N15/66
代理公司: 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 代理人: 胡海国
地址: 518122 广东省深圳市坪山*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 一种全人源化EGFRvIII CART细胞及其制备方法,所述T细胞表面表达全人源化EGFRvIII CAR基因,其碱基序列如SEQ ID NO:3所示。本发明还包括全人源化EGFRvIII CART的制备方法。本发明的优点在于利用全人源化139抗体序列设计构建了3代全人源化EGFRvIII CART的结构,进行了细胞实验和动物实验,皆证明有效,能够活化人T细胞,是目前最新的针对EGFRvIII靶点的CART设计,能够用于人体肿瘤的治疗。
搜索关键词: 一种 全人 egfrviii 嵌合 抗原 受体 细胞 及其 制备 方法
【主权项】:
1.一种全人源化EGFRvIII CART细胞,其特征在于,所述T细胞表面表达全人源化EGFRvIII CAR基因,其碱基序列如SEQ ID NO:3所示;所述全人源化EGFRvIII CAR基因是由合成的ScFV基因和合成的3代CAR结构基因通过重叠PCR进行拼接;所述合成的ScFV基因包括编码CD8信号肽的核苷酸+全人源化139抗体的轻链可变区氨基酸密码子优化的核苷酸+编码linker(G4S)3的核苷酸+全人源化139抗体的重链可变区氨基酸密码子优化的核苷酸序列,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示;所述合成的3代CAR结构基因包括编码CD8铰链区+CD28跨膜区、胞浆区+4‑1BB胞浆区+CD3ζ胞浆区的核苷酸片段,其碱基序列如SEQ ID NO:2所示。
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