[发明专利]一种偶联核酸或蛋白质的温敏聚合物及其应用有效
| 申请号： | 201710050299.5 | 申请日： | 2017-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN106977731B | 公开（公告）日： | 2019-11-15 |
| 发明（设计）人： | 何治柯;王欣欣;吉邢虎;杨昕怡 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C08G81/02 | 分类号： | C08G81/02;C08F120/54;C08F8/40;G01N25/20;G01N21/35;G01N21/33;G01N21/64;G01N33/68 |
| 代理公司： | 42001 武汉宇晨专利事务所 | 代理人： | 董路;王敏锋<国际申请>=<国际公布>= |
| 地址： | 430072湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种偶联核酸或蛋白质的温敏聚合物及其应用，其合成方法为：1)将被偶联物与偶联剂混合，混合均匀，在20‑40℃下反应1‑2小时，得到偶联产物；2)将偶联产物和温敏聚合物单体加入溶解液中，搅拌均匀，得到混合溶液，向混合溶液中加入过硫酸铵和四甲基乙二胺，在低于低临界相转变温度下反应聚合2‑10小时，得到混合体系；3)将混合体系在高于相变温度下进行异相分离提纯，得到具有温度敏感性质的偶联核酸或蛋白质的温敏聚合物。该温敏聚合物能够实现均相反应，异相分离，能用于生物分析检测，只需改变生物素标记的核酸序列或者蛋白质，就能利用捕获物和目标物之间的特异性结合完成对不同生物样品的高效分离富集和分析检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 蛋白质 聚合物 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种偶联核酸或蛋白质的温敏聚合物，其特征在于其合成方法包括如下步骤：/n1）将被偶联物与偶联剂混合，所述的被偶联物为链霉亲和素或5’端修饰有NH2-C6，3’端修饰有生物素的核酸序列，所述的 5’端修饰有NH2-C6，3’端修饰有生物素的核酸序列为NH2-GGGTTGGGCGGGATGGGTTT-Biotin，所述的偶联剂为N-羟基琥珀酰亚胺丙烯酸酯，其中被偶联物中氨基与偶联剂中活性酯基的摩尔比小于1，混合均匀，在20-40℃下反应1-2小时，得到偶联产物；/n2）将偶联产物和温敏聚合物单体加入溶解液中，所述的温敏聚合物单体为N-异丙基丙烯酰胺，加入的温敏聚合物单体与被偶联物中氨基的摩尔比为200-400：1，搅拌均匀，得到混合溶液，向混合溶液中加入过硫酸铵和四甲基乙二胺，在低于低临界相转变温度下反应聚合2-10小时，得到含偶联核酸或蛋白质的温敏聚合物的混合体系；/n3）将混合体系在高于相变温度下进行相变，直至沉淀完全，离心去除上清液，将沉淀重新溶解于低于相变温度的溶解液中，重复以上操作多次，得到具有温度敏感性质的偶联核酸或蛋白质的温敏聚合物。/n
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