[发明专利]浙江金线莲组织培养快速繁殖体系的建立方法

摘要

本发明公开了一种浙江金线莲组织培养快速繁殖体系的建立方法，包括类原球茎诱导、增殖、分化及生根步骤。在液体培养基中，类原球茎诱导的优选培养条件为TDZ 0.6mg/L+NAA 0.4mg/L，诱导率为62.5%；在固体培养基中，类原球茎诱导的优选培养条件为TDZ 0.6mg/L+ NAA 0.2mg/L+6‑BA 2.0mg/L，诱导率为59.3%。类原球茎增殖的优选培养条件为稀效唑1.5 mg/L+6‑BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L，增殖系数为8.4，其中稀效唑是类原球茎增殖的主要因子。类原球茎分化的优选条件为6‑BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L，分化率为87.3%。植株生根诱导的优选培养条件为1/2 MS+NAA 1.0mg/L+IBA 1.0mg/L，生根率达100%。

主权项

一种浙江金线莲组织培养快速繁殖体系的建立方法，其特征是：包括类原球茎诱导、增殖、分化及生根步骤，其中，类原球茎的诱导、增殖及分化以MS为基本培养基，生根以1/2 MS为基本培养基，加入植物生长调节剂，pH 5.8，液体培养基蔗糖质量百分比浓度为5.0%，固体培养基蔗糖质量百分比浓度为3.0%，类原球茎分化培养基中添加质量含量10%香蕉泥；１）类原球茎诱导：采用液体培养基或固体培养基，液体培养基中含 TDZ 0.6 mg/L + NAA 0.4 mg/L；固体培养基含TDZ 0.6 mg/L + NAA 0.2 mg/L + 6‑BA 2.0 mg/L；2）类原球茎增殖：增值培养基中含稀效唑1.5 mg/L + 6‑BA 1.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L，其中稀效唑是类原球茎增殖的主要因子；3）类原球茎分化：对类原球茎进行分化培养，10天类原球茎球体顶部开始突起变尖，变绿，60 天后可分化成带有茎节、叶片及幼小毛状根的小苗，分化培养基中含6‑BA 0.5 mg/L + NAA 0.1 mg/L；4）植株生根：分化的幼苗在生根培养基中培养10 d后开始有根长出，生根培养基中含 NAA 1.0 mg/L + IBA 1.0 mg/L。