[发明专利]一种碳量子点靶向检测线粒体中ONOO‑的方法

摘要

本发明涉及一种碳量子点靶向检测线粒体中ONOO‑的方法，属于生物传感器及离子识别领域。本发明合成的碳量子点(C‑dots‑TPP)荧光探针与ONOO‑由于光诱导电子转移在575nm处的荧光强度会明显降低。本发明的碳量子点荧光探针，在pH＝7.4缓冲溶液中对ONOO‑检测最低限度达到13.5nM。本发明的碳量子点荧光探针合成方法简单、生物相容性好、细胞毒性小、检测灵敏度高、检测迅速且信号稳定，为实现临床检测细胞线粒体中的ONOO‑提供了可能。

主权项

一种碳量子点靶向检测线粒体中ONOO‑的方法，其特征在于：具体步骤如下：步骤一、用pH＝7.4的PBS缓冲液将碳量子点配置成已知浓度的碳量子点分散液；步骤二、将上述分散液转移到石英比色皿中，配置500μM浓度的ONOO‑储备液，每次加入储备液并进行荧光强度测试，保证每次加入后能够形成0.2μM、0.4μM、0.6μM、0.8μM、1μM、2μM、3μM、4μM、5μM、6μM、7μM、8μM、9μM、10μM的浓度梯度，所述加入的储备液总体积不大于石英比色皿中分散液总体积的5％；步骤三、根据步骤二中不同浓度的ONOO‑对探针荧光发射光谱影响，确定荧光发射光谱575nm处荧光强度与ONOO‑浓度的对应关系，在ONOO‑含量为0.2‑1μM区间内，拟合出一条定量检测ONOO‑的标准方程y＝a+bx，其中y为所测的含ONOO‑的探针在最大发射峰575nm位置处对应的荧光强度，x为样品中含有的ONOO‑的含量(单位：μM)a＝0.95279，b＝‑0.14706；步骤四、将含有ONOO‑的待测液样品加入到已知碳量子点探针浓度的pH＝7.4的PBS缓冲液中，测定荧光光谱，将所测得样品在575nm位置处对应的荧光强度数值带入步骤三中所得的ONOO‑定量标准方程中，可以定量确定样品中ONOO‑的含量。