[发明专利]一种牛PDHB基因腺病毒干扰载体构建及其鉴定方法有效
申请号: | 201710018350.4 | 申请日: | 2017-01-11 |
公开(公告)号: | CN106811484B | 公开(公告)日: | 2020-03-10 |
发明(设计)人: | 李安宁;昝林森;武丽娟;王晓宇 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12N15/861 | 分类号: | C12N15/861;C12N15/66;C12N15/113 |
代理公司: | 西安长和专利代理有限公司 61227 | 代理人: | 黄伟洪 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种牛PDHB基因腺病毒干扰载体构建及其鉴定方法,序列为:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3。构建方法包括:载体用BamH I,EcoR I双酶切;酶切完成后胶回收;目的片断利用3’和5’的单链退火获得:目的片段与载体连接反应;转化感受态细胞:DH5a;转化后挑菌,摇菌14小时,测序;将重组腺病毒载体质粒PDHB shRNA与pHBAd‑BHG骨架载体共转染HEK293A细胞,获得重组腺病毒Ad‑PDHB shRNA。本发明的shRNA1、shRNA2和shRNA3对PDHB基因的干扰效率分别为:95.12%、12.69%和97.76%。 | ||
搜索关键词: | 种牛 pdhb 基因 病毒 干扰 载体 构建 及其 鉴定 方法 | ||
【主权项】:
一种牛PDHB基因腺病毒干扰载体,其特征在于,所述牛PDHB基因腺病毒干扰载体的序列为:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3。
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