[发明专利]一种体内检测CART细胞表达的技术及其用途在审
| 申请号： | 201710012270.8 | 申请日： | 2017-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN108285920A | 公开（公告）日： | 2018-07-17 |
| 发明（设计）人： | 黄飞;金涛;王海鹰;何凤;史子啸 | 申请（专利权）人： | 上海恒润达生生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201210 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种CART细胞体内表达效率的检测方法，包括如下步骤：将表达CD19CAR的质粒加入未转染PBMC中提取基因组作为标准品一、将已知表达效率的CART细胞加入未转染PBMC中提取基因组作为标准品二、将梯度稀释PBMC细胞基因组，测内参CDKN1A作为标准品三，三种标准品联合应用做标准曲线，待呈线性关系后，运用荧光定量PCR技术检测CART细胞整合到全基因组DNA中的病毒拷贝数和CART细胞的占PBMC中的百分含量。本发明可计算CART细胞的体内表达情况，计算方法简便，且精确度高，便于实际操作。 | ||
| 搜索关键词： | 标准品 基因组 细胞 体内表达 转染 全基因组DNA 荧光定量PCR 标准曲线 表达效率 病毒拷贝 技术检测 联合应用 梯度稀释 体内检测 细胞表达 细胞整合 线性关系 内参 质粒 检测 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测CART转导效率的引物，其特征在于：包括上游引物和下游引物；所述上游引物的序列为：GGGTTCCAAGCCGATTCAGT，即SEQ ID NO：5；所述下游引物的序列为：CAAGTTGCTAATGGTCAGGGAATA，即SEQ ID NO：6。
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