[发明专利]一种酶活及热稳定性改善的凝乳酶突变体有效
| 申请号： | 201611195945.9 | 申请日： | 2016-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN106754840B | 公开（公告）日： | 2019-06-21 |
| 发明（设计）人： | 丁重阳;张琦;艾连中;王琼;杭锋;苑畅;石贵阳 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/64 | 分类号： | C12N9/64;C12N1/19;C12N15/81;C12R1/84 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酶活及热稳定性改善的凝乳酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明用谷氨酰胺替换凝乳酶第75位亮氨酸，用苏氨酸替换第222位蛋氨酸，并对上述位点的氨基酸进行双突变构建凝乳酶突变体，将突变体在毕赤酵母GS115中异源表达，对表达的粗酶液进行凝乳酶活，蛋白酶活，耐热性检测。双突变体Leu75Gln‑Met222Thr的粗酶液凝乳酶活达到28.0SU/mL，C/P值达到11.7，相比出发菌株P‑cMCE的凝乳酶活和C/P值提升了155.6％及195.0％。45℃恒温半小时的热稳定性降低了13.6％。 | ||
| 搜索关键词： | 凝乳酶 突变体 热稳定性 粗酶液 酶活 替换 耐热性 酶工程技术 毕赤酵母 出发菌株 蛋白酶活 谷氨酰胺 双突变体 异源表达 蛋氨酸 亮氨酸 苏氨酸 氨基酸 构建 位点 突变 检测 | ||
【主权项】：
1.一种凝乳酶突变体，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO.1～3任一所示。
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