[发明专利]一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法

摘要

本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种微生物一步发酵转化生产地塞米松环氧水解物的方法，主要包括以16a‑甲基‑17α,21‑二羟基孕甾‑4烯‑9,11‑环氧‑3,20‑二酮‑21醋酸酯为底物，经简单节杆菌和巨大芽孢杆菌混合发酵直接生产地塞米松环氧水解物。与现有技术相比，本发明利用混合菌种的协同作用，将脱氢、水解两步反应合并为一步，直接得到产物地塞米松环氧水解物；具有生产周期短、生物转化率高、收率高，以及环保、低成本的优势。

主权项

1.一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法，所述的地塞米松中间体是指地塞米松环氧水解物，其特征在于，该方法包括如下步骤：（1）菌种培养将简单节杆菌和巨大芽孢杆菌分别做斜面培养，斜面培养是指将简单节杆菌或巨大芽孢杆菌的斜面培养物接种于种子培养基中，于转速为160~180rpm和温度为30±1℃条件下培养18~30hr，得到简单节杆菌种子培养液和巨大芽孢杆菌种子培养液，备用，（2）发酵转化将步骤（1）得到的简单节杆菌种子培养液接入已灭菌的发酵培养基中，接种量为10~15%；随后将巨大芽孢杆菌种子培养液接入发酵培养基中，接种量为1~5%，于温度30±1℃下培养18~24hr后投入底物中间体I，投入粉碎细度在80目以上的底物中间体I，投料浓度为不超过30g/L，在转化温度为33±1℃下继续培养，至底物中间体I含量≤1.0%，（3）提取、精制发酵转化结束后，发酵液灭活后冷却到室温，抽滤得到滤饼，用二氯甲烷和甲醇的混合溶剂反复萃取滤饼，萃取液加活性炭脱色过滤后，滤液浓缩至干得到地塞米松环氧水解物粗品，再经精制得到地塞米松环氧水解物精品，主要的结构式有：，。