[发明专利]一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒

摘要

本发明公开了一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒，主要包括盒体和遮光盖，所述的盒体内设置有胚胎培养卡槽、测试瓶卡槽、吸管、营养供给卡槽，所述的胚胎培养卡槽内置有胚胎瓶和培养液瓶，所述的测试瓶卡槽内放置有多个测试瓶，所述的测试瓶包括24孔培养液瓶和培养皿，所述的培养液瓶和培养皿之间设有吸管。该试剂盒是将优选的斑马鱼健康胚胎直接进行急性毒性检测，过程简单，易操作，不易受外界其他因素影响，提高定性检测效率，压缩检测数据，节省检测时间，应用范围广泛。

主权项

一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒，其特征在于，试剂盒主要包括盒体(1)和遮光盖(2)，所述的盒体(1)内设置有胚胎培养卡槽、测试瓶卡槽(8)、吸管(9)、营养供给卡槽(7)，所述的胚胎培养卡槽内置有胚胎瓶(4)和培养液瓶(3)，所述的胚胎瓶(4)内盛放斑马鱼胚胎，所述的测试瓶卡槽(8)内放置有多个测试瓶，测试瓶内装有待测溶剂及对比实验溶剂，所述的测试瓶包括24孔培养液瓶(6)和培养皿(5)，所述的培养液瓶(6)和培养皿(5)之间设有吸管(9)；所述的试剂盒的制备方法主要包括以下步骤：a.挑选适宜的斑马鱼进行培养，收集斑马鱼胚胎，制成胚胎瓶(4)；b.制备胚胎培养液；c.制备试剂盒盒体(1)，并将胚胎培养卡槽、测试瓶卡槽(8)、吸管(9)、营养供给卡槽(7)进行生产组装，即得到所述的斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒；所述的胚胎瓶(4)制备方法为：选择游动和体色均正常，摄食无异常的4‑5月龄的健康性成熟的斑马鱼按照雌雄比例为1：1.5‑2的比例放入交配容器内，并在交配容器内设置围挡，在25‑30℃的环境下自然交配24‑36小时，在交配过程中自然交配并收集受精卵三次，将三次收集到的受精卵使用胚胎培养液清洗，并去除杂质和坏卵，之后置于胚胎培养液中并放入恒温培养箱中，25‑30℃下静置控光培养，通过光控系统，保持光照14h/黑暗10h交替的光照周期，当2‑4hpf时，在显微镜下挑选来自同一亲本、正常发育比率达90％以上且发育时期一致的斑马鱼胚胎，然后加入胚胎瓶(4)中，每瓶的加入量为20只；收集受精卵的时间为次日的9‑10时；所述的胚胎培养液制备方法为：用pH为7.2‑8.5的弱碱性水直接配制，胚胎培养液中含有NaCl 5.5mM，KCl 0.18mM，CaCl2 0.35mM，MgSO4 0.35mM，使用1.5M的NaHCO3调节pH至7.0‑7.2；由NaCl饱和溶液调节电导率在500‑550μs；培养液配制水温维持在25‑30℃。