[发明专利]一种采用带节茎段培养绿萝的方法

摘要

本发明公开了一种采用带节茎段培养绿萝的方法。本发明的方法包括以下步骤：(1)提供一带节茎段；(2)将所述带节茎段进行诱导培养，形成愈伤组织；(3)将所述愈伤组织进行继代培养；(4)将经所述继代培养的愈伤组织进行诱导培养，形成丛生芽；(5)将所述丛生芽进行生根培养，形成绿萝根苗；(6)将所述绿萝根苗栽培。本发明的培养方法，以绿萝带节茎段作为外植体材料，利用组织培养对绿萝进行快速繁殖，不受季节与气候的限制，可有效地大量繁殖绿萝后代，极大的缩短了生产周期，且后代遗传性状与亲本高度一致，为绿萝规模化生产提供了一条有效途径。

主权项

1.一种采用带节茎段培养绿萝的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提供一带节茎段；(2)将所述带节茎段进行诱导培养，形成愈伤组织；(3)将所述愈伤组织进行继代培养；(4)将经所述继代培养的愈伤组织进行诱导培养，形成丛生芽；(5)将所述丛生芽进行生根培养，形成绿萝根苗；(6)将所述绿萝根苗栽培；形成愈伤组织的诱导培养包括第一阶段培养以形成膨大体，以及第二阶段培养以形成愈伤组织；所述第一阶段和第二阶段培养的温度均为25～28℃，湿度为50～65％；所述第一阶段培养的天数为28～32d；所述第二阶段培养的天数为38～42d；第一阶段的培养基为412.5mg/L硝酸铵、475mg/L硝酸钾、110mg/L氯化钙、92.5mg/L硫酸镁、42.5mg/L磷酸二氢钾、0.415mg/L碘化钾、3.1mg/L硼酸、11.15mg/L硫酸锰、4.3mg/L硫酸锌、0.125mg/L钼酸钠、0.0125mg/L硫酸铜、0.0125mg/L氯化钴、13.9mg/L硫酸亚铁、18.65mg/L EDTA二钠、1～5mg/L肌醇、0.5～3mg/L烟酸、0.5～2mg/L盐酸吡哆醇、3～6mg/L盐酸硫胺素、2.0mg/L甘氨酸、50mg/L精氨酸、100mg/L天冬氨酸、150mg/L谷氨酸、1.0～3.0mg/L 6‑BA、0.08～0.12mg/L TDZ、0.1～0.3mg/Lα‑萘乙酸、0.03～0.07mg/L 2,4‑D、25～35g/L蔗糖和5～10g/L琼脂粉；第二阶段的培养基为825mg/L硝酸铵、950mg/L硝酸钾、220mg/L氯化钙、185mg/L硫酸镁、85mg/L磷酸二氢钾、0.83mg/L碘化钾、6.2mg/L硼酸、22.3mg/L硫酸锰、8.6mg/L硫酸锌、0.25mg/L钼酸钠、0.025mg/L硫酸铜、0.025mg/L氯化钴、27.8mg/L硫酸亚铁、37.3mg/L EDTA二钠、1～5mg/L肌醇、0.5～3mg/L烟酸、0.5～2mg/L盐酸吡哆醇、3～6mg/L盐酸硫胺素、2.0mg/L甘氨酸、100mg/L精氨酸、50mg/L天冬氨酸、200mg/L谷氨酸、2.0～4.0mg/L 6‑BA、0.4～0.6mg/L IBA、25～35g/L蔗糖、200～500g/l的水解酪蛋白和5～10g/L琼脂粉；所述继代培养的培养基为1650mg/L硝酸铵、1900mg/L硝酸钾、440mg/L氯化钙、370mg/L硫酸镁、170mg/L磷酸二氢钾、0.83mg/L碘化钾、6.2mg/L硼酸、22.3mg/L硫酸锰、8.6mg/L硫酸锌、0.25mg/L钼酸钠、0.025mg/L硫酸铜、0.025mg/L氯化钴、27.8mg/L硫酸亚铁、37.3mg/L EDTA二钠、1～5mg/L肌醇、0.5～3mg/L烟酸、0.5～2mg/L盐酸吡哆醇、3～6mg/L盐酸硫胺素、2.0mg/L甘氨酸、1.0～3.0mg/L 6‑BA、0.9～1.1mg/L玉米素、0.2～0.4mg/L吲哚乙酸、40～60mg/L维生素C、20～30g/L蔗糖和5～10g/L琼脂粉；形成丛生芽的诱导培养所采用的诱导培养基为MS培养基、0.05～0.1mg/L 6‑BA、1～2mg/L吲哚丁酸、0.5～1mg/Lα‑萘乙酸、25～35g/L蔗糖、25～35g/L香蕉和5～10g/L琼脂粉；所述生根培养的培养基为MS培养基、0.05～0.1mg/Lα‑萘乙酸、0.01～0.05mg/L吲哚乙酸、25～35g/L蔗糖、30～50g/L土豆泥和5～10g/L琼脂粉。