[发明专利]一种检测HIV-1 p24抗原的试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了一种检测HIV‑1 p24抗原的试剂盒，包括酶标板、样品稀释液、酶结合物、阴性对照物、阳性对照物、底物液、显色液、终止液以及洗涤液；所述酶标板由鼠抗HIV‑1 p24单克隆包被抗体包被，所述鼠抗HIV‑1 p24单克隆包被抗体是2‑C6抗体；所述样品稀释液中含有生物素标记鼠抗HIV‑1 p24单克隆抗体，所述生物素标记鼠抗HIV‑1 p24单克隆抗体是生物素标记11‑A4抗体。此外，本发明还公开该试剂盒的应用，通过实验证明，采用本发明提供试剂盒不仅操作简单、检测结果准确、明了，而且使用该试剂盒检测HIV‑1 p24抗原，能够使抗原敏感性达到了1.25IU/mL，显著优于现有普通HIV‑1 p24检测试剂盒的检测敏感性。

主权项

1.一种检测HIV‑1 p24抗原的试剂盒，其特征在于，包括酶标板、样品稀释液、酶结合物、阴性对照物、阳性对照物、底物液、显色液、终止液以及洗涤液；所述酶标板由鼠抗HIV‑1 p24单克隆包被抗体包被，所述鼠抗HIV‑1 p24单克隆包被抗体是2‑C6抗体，所述2‑C6抗体是保藏编号为 CGMCC No.12981的杂交瘤细胞株2‑C6分泌得到的；所述鼠抗HIV‑1 p24单克隆包被抗体的包被量为4 μg/mL；所述样品稀释液中含有生物素标记鼠抗HIV‑1 p24单克隆抗体，所述生物素标记鼠抗HIV‑1 p24单克隆抗体是生物素标记的11‑A4抗体；所述11‑A4抗体是保藏编号为 CGMCC No.12982的杂交瘤细胞株11‑A4分泌得到的；所述生物素标记鼠抗HIV‑1 p24单克隆抗体的含量为2 μg/mL；所述杂交瘤细胞株是通过使用来自HIV‑1B亚型或HIV‑1E亚型的抗原片段免疫小鼠，筛选制备的；所述样品稀释液是指将生物素标记鼠抗HIV‑1 p24单克隆抗体溶于缓冲液中形成的溶液，每升所述缓冲液按如下方式配置：将11‑12.5g的Tris、1‑2 g的酪蛋白钠、10‑15 mL的 Tween‑20、8‑12 mL质量百分比浓度为10%的番红花提取素和1‑1.5 g的硫柳汞溶解于注射用水中，用注射用水定容至1000 mL，所述Tris用盐酸调节pH值至7.5；所述酶结合物为含有辣根过氧化物酶标记链霉亲和素的缓冲稀释液；所述酶结合物是将辣根过氧化物酶标记链霉亲和素溶于缓冲稀释液中形成的溶液；所述辣根过氧化物酶标记链霉亲和素在酶结合物中的体积百分比含量为0.025%；每升所述缓冲稀释液按如下方法配置：将12‑13 g Tris、9‑11 g BSA、1‑1.2 g酶稳定剂、10‑12 mL曲拉通、1‑1.5mL Proclin 300、0.2‑0.3 mL质量比浓度为4%的固绿溶解于注射用水中，用注射用水定容至1000 mL，所述Tris用盐酸调节pH值至7.5；所述阴性对照物为检测HIV‑1 p24抗原为阴性的人血清；所述阳性对照物为含有重组HIV‑1 p24抗原阳性对照品的稀释液；所述显色液为含有四甲基联苯胺的柠檬酸缓冲液；所述底物液为含有过氧化氢尿素的磷酸缓冲液；所述终止液为硫酸溶液，以及所述洗涤液为磷酸盐缓冲液。