[发明专利]一种基因组原位杂交中封阻DNA制备方法

摘要

本发明涉及基因组原位杂交中封阻DNA制备方法。一种基因组原位杂交中封阻DNA制备方法，其特征在于包括以下步骤（1）取1g大白菜幼嫩叶片，在液氮冷冻下迅速将叶片研磨成粉末，然后转入离心管中，加入6 mL预热的提取缓冲液，混匀，在65℃水浴1h；（2）将步骤（1）产物，冷却至室温后，加入等体积的241的氯仿、异戊醇混合物，混和局均匀。本方法提取的大白菜基因组DNA经0．8％琼脂糖凝胶电泳检测，结果显示点样孔干净，DNA无降解，无RNA，基因组DNA质量较高。

主权项

一种基因组原位杂交中封阻DNA制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）取1g大白菜幼嫩叶片，在液氮冷冻下迅速将叶片研磨成粉末，然后转入离心管中，加入6 mL预热的提取缓冲液，混匀，在65℃水浴1h；（2）将步骤（1）产物，冷却至室温后，加入等体积的24:1的氯仿、异戊醇混合物，混和局均匀；（3）用剪尖枪头将上清液转移至新的离心管中，加入等体积预冷的异丙醇，缓慢混匀，在零下20℃静置1h；（4）将步骤（3）产物在4℃环境下离心5‑10min，弃上清液，所述离心速度为将10000 r/min；（5）用70％乙醇洗2次后，在空气中干燥沉淀；（6）将步骤（5）产物溶于TE缓冲液，加入浓度为50‑60毫克/毫升的RNase，在37℃水浴30～60分钟；（7）加入1/10体积3mol／L醋酸钠pH为5.2，2倍体积预冷乙醇，混匀，在零下20℃环境下静置20min；（8）对步骤（7）产物进行离心处理，以12000r/min，离心5分钟，弃上清，以70％乙醇洗2次。