[发明专利]一种白僵菌分离扩繁方法

摘要

本发明公开一种白僵菌分离扩繁方法，包括(1)白僵菌孢子液制备用无菌接种环从白僵蚕表面挑取3—4环分生孢子粉，置于无菌水中，振荡10—15min，直至均匀，得白僵菌孢子液；(2)分离纯化培养将白僵菌孢子液接种于选择培养基中，在25—26℃条件下培养4—6天，得白僵菌菌种；(3)一次扩大培养将白僵菌菌种接种于液体培养基中，在24—25℃、振荡条件下培养2—3天，得到白僵菌菌丝体；(4)二次扩大培养将白僵菌菌丝体接种于固体培养基中，在25—26℃条件下培养5—9天，得到扩繁后的白僵菌，所述固体培养基的含水量为60—75％。所述方法的工艺简单，生产成本低，生产周期短，提高了生产效率，显著减少杂菌污染，成功率高，扩繁后的白僵菌质量稳定。

主权项

一种白僵菌分离扩繁方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：(1)白僵菌孢子液制备：用无菌接种环从白僵蚕表面挑取3—4环分生孢子粉，置于无菌水中，振荡10—15min，直至均匀，得白僵菌孢子液；(2)分离纯化培养：将步骤(1)得到的白僵菌孢子液接种于选择培养基中，在25—26℃条件下培养4—6天，得白僵菌菌种，所述选择培养基的组分包括：PDA培养基，补充龙胆紫、苯菌灵、脱氧胆酸钠、头孢霉素、放线菌酮、多果定中的至少一种；(3)一次扩大培养：将步骤(2)得到的白僵菌菌种接种于液体培养基中，在24—25℃、振荡条件下培养2—3天，得到白僵菌菌丝体，所述液体培养基的组分按重量份数计包括：葡萄糖4—6份、马铃薯汁5—10份、蛋白胨2—10份、头孢霉素1—2份、BaCl21—2份、CaCl21—2份、无菌水20—80份；(4)二次扩大培养：将步骤(3)得到的白僵菌菌丝体接种于固体培养基中，在25—26℃条件下培养5—9天，得到扩繁后的白僵菌，所述固体培养基的组分按重量份数计包括：葡萄糖2—5份、豆粕3—8份、玉米粉10—20份。