[发明专利]蛹虫草多糖多维指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱

摘要

本发明公开了一种蛹虫草多糖多维指纹图谱的构建方法，涉及中药和功能食品原料及其制品的指纹图谱技术领域。包括从蛹虫草中提取蛹虫草多糖，将提取的蛹虫草多糖，经紫外吸收光谱指纹分析、傅里叶变换红外光谱指纹分析和高效凝胶渗透色谱法指纹分析，获得蛹虫草多糖的UV光谱标准指纹图谱、IR光谱标准指纹图谱和HPGPC色谱标准指纹图谱的多维指纹图谱构建方法。本发明方法具有操作简单、稳定、灵敏、精密度高、重现性好等优点，能从色谱的整体特征面貌上把握蛹虫草多糖质量情况，为蛹虫草质量控制和真伪鉴别提供了新的科学方法。

主权项

1.一种蛹虫草多糖多维指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)蛹虫草多糖的制备/n取干燥的蛹虫草药材，粉碎，加入无水乙醇，80℃条件下提取2h，过滤后重复提取2次，除去含有的脂溶性化合物；药材残渣加入蒸馏水中，于260W的超声波提取仪80℃条件下提取15min，然后在80℃恒温下水浴提取2h，过滤后重复提取2次，合并水提液，减压浓缩，加入无水乙醇沉淀，干燥后得蛹虫草多糖；/n(2)蛹虫草多糖的紫外吸收光谱指纹分析及标准指纹图谱的确定/n称取烘干至恒重的蛹虫草多糖，以蒸馏水溶解，得蛹虫草多糖溶液；采用紫外-可见分光光度计对蛹虫草多糖溶液于250～400nm区间进行扫描，得蛹虫草多糖UV吸收光谱图，再使用中药色谱指纹图谱相似度评价软件处理图谱，并进行数据处理与分析，得到蛹虫草多糖的UV光谱标准指纹图谱；/n(3)蛹虫草多糖的傅里叶变换红外光谱指纹分析及标准指纹图谱的确定/n称取烘干至恒重的蛹虫草多糖，在红外灯下，经压片法压片，以干燥的KBr为空白样品扣除背景吸收后，将样品与KBr混合研磨压片，在4000-500cm^-1的区间范围内进行红外光谱扫描，保存蛹虫草多糖的红外吸收图谱以及其数据，运用中药色谱指纹图谱相似度评价软件处理图谱，并进行数据处理与分析，得到蛹虫草多糖的IR光谱标准指纹图谱；/n(4)蛹虫草多糖的高效凝胶渗透色谱法指纹分析及标准指纹图谱的确定/n称取烘干至恒重的蛹虫草多糖，以蒸馏水溶解，离心，取上清液，用微孔滤膜过滤，得蛹虫草多糖HPGPC分析供试液，上样于Sephacryl S-300HR column凝胶渗透色谱柱，以蒸馏水作为洗脱液，恒流泵调节凝胶渗透色谱柱的流速为0.3mL/min，柱温：30℃，检测器：紫外检测器系统，经高效凝胶渗透色谱仪分离检测，收集器收集到的每管样品溶液经苯酚-硫酸法显色，测定其吸光度，从而检测出蛹虫草多糖样品的出峰液分布，得蛹虫草多糖的HPGPC色谱图，运用中药色谱指纹图谱相似度评价软件处理图谱和数据，得到蛹虫草多糖的HPGPC色谱标准指纹图谱；/n其中，所述蛹虫草多糖的HPGPC色谱标准指纹图谱共有特征峰为4个，其相对平均分子量分别为：/n1号峰，相对平均分子量为1.18×10⁶Da；/n2号峰，相对平均分子量为4.32×10⁵Da；/n3号峰，相对平均分子量为3.38×10⁴Da；/n4号峰，相对平均分子量为6.54×10³Da。/n