[发明专利]一种化学转化制备抗病原菌活性齐墩果烷型皂苷的方法

摘要

本发明公开了一种化学转化制备抗病原菌活性齐墩果烷型皂苷的方法，以无患子果实等所含齐墩果烷皂苷植物为原料，通过醇浸提取、用稀酸、或稀碱、或先稀酸后稀碱、或先稀碱后稀酸对粗皂苷提取液进行定向水解转化，使非抗菌活性皂苷转化成活性齐墩果烷三糖基皂苷，再将活性齐墩果烷三糖基皂苷通过大孔树脂吸附、水洗脱除酸、碱或盐，醇洗获得高浓度的抗病原菌活性齐墩果烷型皂苷。所制备的皂苷对稻瘟病等多种作物病原真菌具有防控活性，且抗菌中有效浓度比原料混合皂苷得到大大降低。

主权项

1.一种化学转化制备抗病原菌活性齐墩果烷型皂苷的方法，其特征在于：A、无患子果实材料：11月前后，采摘和拾取的成熟未霉烂的无患子果实，去果壳和果核，取中果皮冷藏或室温风干后保存备用；B、粗皂苷提取：将上述保存备用的无患子的中果皮按1：5～8（w/v)的比例加60%～80%乙醇水溶液浸泡12～24 h，60～90℃水浴浸提3～10 h，滤布热过滤，残渣再反复浸提2～3次，合并滤液，滤液冷却，减压回收乙醇溶剂，浓缩获得粗皂苷提取液；C、粗皂苷定向水解转化：对粗皂苷提取液用化学转化剂进行水解转化，得到抗病原菌活性齐墩果烷三糖基皂苷即3‑o‑α‑D‑木糖基（1→3）‑α‑L‑鼠李糖基（1→2）‑α‑L‑阿拉伯糖基常春藤苷；所述的定向水解转化为酸转化，化学转化剂为2 M盐酸溶液，即：在粗皂苷提取液中缓慢加入0.5～14mL的2 M盐酸溶液，得到混合皂苷水溶液，并用水调节得到混合皂苷水溶液中盐酸的终浓度为0.05～0.7M，在60～90℃下水解12～24 h；或，所述的定向水解转化为碱转化，化学转化剂为2 M氢氧化钠溶液，即：在粗皂苷提取液中缓慢加入1～10mL的2 M氢氧化钠溶液，得到混合皂苷水溶液，并用水调节混合皂苷水溶液中氢氧化钠的终浓度为0.1～1 M，在60～90℃下水解12～24 h；或，所述的定向水解转化为先酸后碱转化，化学转化剂为2 M盐酸溶液和2 M氢氧化钠溶液，即：在粗皂苷提取液中缓慢加入0.5～14mL的2 M盐酸溶液，得到混合皂苷水溶液，并用水调节混合皂苷水溶液中盐酸的终浓度为0.05～0.7M，60～90℃下水解12～24 h后，再用2 M氢氧化钠溶液调节混合皂苷水溶液中氢氧化钠的终浓度为0.1～1 M，60～90℃下水解12～24 h；或，所述的定向水解转化为先碱后酸转化，化学转化剂为2 M氢氧化钠溶液和2 M盐酸溶液，即：在粗皂苷提取液中缓慢加入1～10mL的2 M氢氧化钠溶液得到混合皂苷水溶液，并用水调节混合皂苷水溶液中氢氧化钠终浓度为0.1～1 M，在60～90℃下水解12～24 h后，再用2 M盐酸溶液调节混合皂苷水溶液中盐酸终浓度为0.05～0.7M，60～90℃下水解12～24 h；D、活性齐墩果烷三糖基皂苷的去杂：将步骤C中反应的混合皂苷液灌注于D101大孔树脂柱中直至穿透点，让D101大孔树脂柱吸附1～3h，用3～5倍柱体积的蒸馏水洗脱除杂，除去酸或碱或盐，再用3倍柱体积的80%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，获得成品：抗病原菌活性齐墩果烷型三糖基皂苷。