[发明专利]猪脑蛋白抗氧化肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种猪脑蛋白抗氧化肽的制备方法，其包括以下步骤步骤一，预处理取新鲜猪脑制得脱脂脑蛋白粉备用；步骤二、超声波处理猪脑蛋白粉取脱脂脑蛋白粉按照体积比为1200的比例加入去离子水，使脑蛋白粉完全溶解；逆流脉冲超声波处理将冷却至室温的脑蛋白粉置于逆流脉冲超声波处理器中处理，其中，超声频率为20kHz，功率为60‑100W，超声4‑6min，期间超声时间2s，间歇时间2s；步骤三，酶解提取粗猪脑多肽，制得猪脑多肽粗提液；步骤四，分离采用截留分子量为3‑5kDa的超滤膜进行分级分离；步骤五，纯化利用DEAE‑52纤维树脂层析柱对步骤四制备的猪脑多肽进行二次纯化；制得猪脑蛋白抗氧化肽。

主权项

一种猪脑蛋白抗氧化肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，预处理：取新鲜猪脑冲洗，切碎，经过脱脂、干燥并研磨成粉，制得脱脂脑蛋白粉备用；步骤二、超声波处理猪脑蛋白粉：取步骤一制得的脱脂脑蛋白粉按照体积比为1:200的比例加入去离子水，磁力搅拌20‑40min，置于40‑60℃水浴中保温0.5‑1.5h，使脑蛋白粉完全溶解；逆流脉冲超声波处理：将冷却至室温的脑蛋白粉置于逆流脉冲超声波处理器中处理，其中，超声频率为20kHz，功率为60‑100W，超声4‑6min，期间超声时间2s，间歇时间2s；步骤三，酶解提取粗猪脑多肽：超声后的猪脑蛋白溶液加入碱性蛋白酶进行酶解，其中酶底比为1000‑3000U/g；pH值为8.0‑9.0，酶解温度为30‑50℃，酶解时间为80‑100min；酶解后立即将酶解液置于沸水浴中静置5‑15min；待冷却至室温，于8000‑12000rpm离心10‑20min，取上清液，制得猪脑多肽粗提液；步骤四，分离：将超声辅助酶解得到的猪脑多肽粗提液，采用截留分子量为3‑5kDa的超滤膜进行分级分离，收集所得产物冷冻干燥后制得猪脑多肽，其中，控制超滤膜出口压力小于5Bar；步骤五，纯化：利用DEAE‑52纤维树脂层析柱对步骤四制备的猪脑多肽进行二次纯化；制得猪脑蛋白抗氧化肽。