[发明专利]一种油性基质灭菌D值的检测方法

摘要

本发明公开了一种油性基质灭菌D值的检测方法，步骤是：A、生物指示剂的使用：将枯草芽孢杆菌接种至芽孢培养基进行培养形成芽孢，离心洗涤收集芽孢，将芽孢冷冻干燥粉碎成活性芽孢粉；B、油性基质加热灭菌操作：将装于玻璃或不锈钢容器中的油性基质置于油浴锅中，搅拌，油性基质升温并稳定到预定灭菌温度后，取枯草芽孢杆菌冻干芽孢粉加入到油性基质中，灭菌处理；C、油性基质中残存活体芽孢数的检测：将枯草芽孢杆菌冻干芽孢粉加入到油性基质中后，搅拌，从油性基质中取无菌Tween‑80混合，再加入无菌稀释液，静置，取下层乳液进行不同梯度稀释，培养，计算出油性基质加热灭菌的D值。方法易行，操作简便，检测结果有效、可靠、稳定。

主权项

一种油性基质灭菌D值的检测方法，其步骤是：A、生物指示剂的使用：使用枯草芽孢杆菌的冻干芽孢粉作为生物指示剂，将枯草芽孢杆菌接种至芽孢培养基进行培养形成芽孢，离心洗涤收集芽孢，将芽孢冷冻干燥粉碎成活性芽孢粉；B、油性基质加热灭菌操作：将装于玻璃或不锈钢容器中的油性基质置于油浴锅中，开启电动搅拌器进行搅拌，油性基质升温110℃‑150℃并稳定到预定灭菌温度110℃‑150℃后，取适量的枯草芽孢杆菌冻干芽孢粉加入到油性基质中，立即计时，进行不同时间的加热110℃‑150℃灭菌处理；C、油性基质中残存活体芽孢数的检测：将枯草芽孢杆菌冻干芽孢粉加入到油性基质中后，计时，并用电动搅拌器进行搅拌使芽孢粉尽可能分散均匀，每隔一定的时间从油性基质中取适量的样品与适量的无菌Tween‑80混合，再加入适量体积的无菌稀释液，充分震荡使其分散成乳浊液，静置，取下层乳液进行不同梯度稀释，取适量稀释乳液涂布于平板培养基上进行培养，根据平板上长出的单菌落数计算经过不同灭菌时间后的油性基质中残存的芽孢数量，以灭菌时间对残存芽孢数的对数作图，计算出油性基质加热灭菌的D值。