[发明专利]一种食、药用外生菌根菌制种

摘要

本发明公开了一种食、药用外生菌根菌制种，采用常规食用菌人工栽培工序即取种‑制母种‑制原种‑制栽培种‑制栽培袋‑出菇管理，本发明的特点是：在取种时使用无菌保鲜液处理子实体，取靠近菌索的菌柄基部组织块，组织分离和母种培养基采用PDA培养基加松树汁，原种和栽培种采用稻谷颗粒种，栽培方法用塑料袋栽培覆土出菇，配合补水补液实现外生菌根菌一次栽培多年多季节出菇。

主权项

1.一种食、药用外生菌根菌制种和人工栽培方法，采用常规食用菌人工栽培工序即取种‑制母种‑制原种‑制栽培种‑制栽培袋‑出菇管理，本发明的特征是：(1.1)采种时用无菌保鲜液在采集地就地处理子实体，组织分离在无菌无毒环境中取靠近菌索的菌柄基部黄豆大组织块，转入母种培养基上，于25‑32℃中培养，待组织块萌发菌丝后提纯转管；(1.1.1)无菌保鲜液配制方法，配方为食用明矾10克、加碘食盐20克、3％呋喃丹30克、水1000毫升，配制方法为：将明矾和呋喃丹分别加水加热溶解后，过滤，取滤液混合，加食盐熔解后装瓶灭菌，用时摇匀；(1.1.2)食、药用外生菌根菌母种培养基配制方法：A.制松树汁：取鲜马尾松无节木质部为原料剁或粉碎成颗粒，加水煮沸后改文火熬制2小时，1千克木料加水1升熬至0.5升用纱布过滤备用；B.制马铃薯汁：将0.25千克去皮马铃薯加水0.7升，用文火熬至0.5升，过滤，备用；C.磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁1克，用少量热水溶解；D.将上述三种溶液混合，加琼脂20克、蔗糖20克，煮沸溶解后文火煮干至1000毫升，分装试管，每管10毫升；试管棉塞内端包微孔防潮膜，然后7支1捆，捆紧后包牛皮纸；E.灭菌时必须先将高压锅内冷空气排出，灭菌压力为1.2‑1.5千克/平方厘米，灭菌45分钟，压力回0后开锅，让余热烘干棉塞，于50℃温度左右摆斜面；摆斜面时试管上下需盖保温材料，待斜面凝固后立即将试管竖直让冷凝水重新回到斜面内；(1.2)原种、栽培种使用稻谷颗粒种，其制备方法是：将发芽破胸的稻谷用马铃薯20％、白糖2％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.05％混合液煮沸杀青，拌入3％石膏粉，用盐水瓶分装灭菌；冷却后接种，置25‑32℃温度下培养，三天后进行第一次摇瓶，以后每天摇一次瓶并检查纯度，直至菌丝充满谷粒，栽培种用同样的方法扩大培养1次；(1.3)栽培袋的制作方法是：(1.3.1)栽培料配方是：马尾松新鲜木屑400千克、棉壳100千克、麦麸100千克、白糖10千克、磷酸二氢钾0.75千克、硫酸镁0.5千克、马尾松林地腐殖质土100千克、明矾5千克，含水量60％，PH自然；(1.3.2)培养料采用两次灭菌方法：培养料混合拌匀调湿后，迅速装入75cm*45cm纤维袋中，离地建堆，堆四周用塑料膜密封，设保温层，保温层外加通过地脚螺栓固定的双层密网，利用风机加压使高压蒸汽在蒸汽发生器和培养料中快速循环加热，培养料在1个小时达到55℃，2小时达到70℃，3小时达到85℃，并保持4小时，经这样预蒸，干湿均匀的培养料翻凉后，分装塑料袋，十袋装入一纤维袋；再进行第二次蒸汽消毒，保持温度100℃10小时；(1.3.3)接种方法为：接种前将菌种摇散，火焰消毒瓶口，打开塑料袋后，用手指隔膜在基料面上挖一小孔，菌种倒入孔内，用手指隔膜挤捏培养料盖严菌种，再用扁形环套口，袋口反折后用橡皮筋扎口，接种后的菌袋袋口朝下，就地接种就地培养；培养温度为25‑32℃，湿度为70％，菌丝基本布满培养料，气温稳定在32℃以下时打孔通气；(1.3.4)打孔通气的方法是：将长满菌丝的菌筒用特制的高温电烙铁在菌筒的下部打三至四个手指粗的孔通气，打孔后的菌筒排放在底铺有塑料膜的干净河沙上，坚持早晚喷洒消毒杀虫杀螨剂，温度保持在25‑32℃；(1.3.5)消毒杀虫杀螨剂的配制方法：配比为40％甲醛溶液900毫升、无水乙醇50毫升、40％乐果20毫升、80％敌敌畏20毫升、20％三氯杀螨醇10毫升，配制方法是将乐果、敌敌畏、三氯杀螨醇分别量取，倒入一个非金属容器中，加入酒精，摇匀后加入甲醛，充分摇匀后装瓶密封，置阴凉干燥处避光保存，用时摇匀；(1.4)出菇管理方式是；将发好菌的菌筒脱袋，排放在消毒过的出菇场地上，每袋菌筒间留间隙4cm，边排边盖好塑料膜；待菌筒恢复伤口并长菌丝时分4次盖发酵料土和松林土每次1‑2厘米后，盖土后喷杀虫螨剂，菌丝长出土表再在箱面种植禾本科植物，待草长到二叶一心时喷雾状水，采用白天盖膜，晚上盖无纺布，早晨5:30‑7:30不盖物，促进子实体的形成和生长；(1.4.1)制作发酵料土；选田土或菜土晒干过筛，每1000千克放人粪100千克、过磷酸钙20千克、马尾松树木屑100千克、明矾10千克、呋喃丹10千克，拌匀调水至含水量60％，堆成长条，上盖透明塑料膜，利用太阳光照发热发酵半个月，建堆后第七天进行第一次翻堆至预先消毒杀虫的空地上，表面喷洒5％的消毒杀虫杀螨剂，打通气孔至料底，盖塑料膜，第10天将料土二次翻堆，15天后晒干备用；(1.4.2)出菇场地消毒，选排水良好座北朝南的空地，搭建阴蓬开好排水沟，气温稳定在35℃以下后，场地整箱喷洒消毒杀虫杀螨剂，盖膜60小时进行场地消毒。