[发明专利]以碱性橙‑溴化十六烷基三甲基铵为探针检测DNA的方法

摘要

本发明公开了一种以碱性橙‑溴化十六烷基三甲基铵(CTMAB)为探针检测DNA的方法，以碱性橙‑CTMAB复合物为探针，建立了测定DNA的灵敏的共振光散射方法，在普通的荧光分光光度计上选择合适的激发和发射狭缝宽度，采用相等的激发和发射波长同时扫描激发和发射单色器(Δλ＝0nm)即可得到。本发明以DNA加入前后碱性橙‑CTMAB体系共振光散射强度出现的灵敏信号(共振光散射峰强度增加值，ΔIRLS)为检测信号，建立其与DNA浓度之间的关系。本研究方法具有操作简单﹑测定灵敏度高等特点，检测限可达纳克级，为生化和临床分析提供了一条新的途径，具有广泛的应用前景。

主权项

以碱性橙‑溴化十六烷基三甲基铵(CTMAB)为探针检测DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、于10mL容量瓶中依次加入适量的碱性橙、BR缓冲液和CTMAB，然后用水定容至刻度，混匀，静置15分钟后进行测试；在200‑800nm的波长范围内，在Δλ＝0nm的条件下同步扫描激发和发射单色器，狭缝宽度为5.0nm，波长扫描速度为200nm/min，得到共振光散射光谱，然后在最大共振光散射峰处(λ＝560.0nm)测量溶液的共振光散射强度；B、于10mL容量瓶中依次加入适量的碱性橙、BR缓冲液、CTMAB和DNA，然后用水定容至刻度，混匀，静置15分钟后进行测试；在200‑800nm的波长范围内，在Δλ＝0nm的条件下同步扫描激发和发射单色器，狭缝宽度为5.0nm，波长扫描速度为200nm/min，得到共振光散射光谱，然后在最大共振光散射峰处(λ＝560.0nm)测量溶液的共振光散射强度；C、通过检测得到的DNA加入前后碱性橙‑CTMAB体系的共振光散射峰强度增加值来计算DNA浓度大小。