[发明专利]一种面粉中糖脂含量的测定方法在小麦粉中的应用

摘要

本发明涉及一种面粉中糖脂含量的测定方法及其应用，该测定方法包括以下步骤：（1）采用比色法测定面粉中相应组分的总糖含量；（2）结合步骤（1）中得到的总糖含量，根据方程y₁=0.0271x‑0.0288计算出双半乳糖甘油二脂的含量，其中x为总糖含量，y₁为双半乳糖甘油二脂含量；结合步骤（1）中得到的总糖含量，根据方程y₂=2.3567x‑1.2032计算出单半乳糖甘油二脂的含量，其中x为总糖含量，y₂单半乳糖甘油二脂含量。该方法测量简便、快捷，能够准确地测定面粉或淀粉中极性糖脂含量。

主权项

1.一种面粉中糖脂含量的测定方法在小麦粉中的应用，包括以下步骤：1）采用比色法测定面粉中的相应组分的总糖含量：（1）先将40~80目的小麦粉加水饱和的正丁醇溶液中搅拌浸渍得到混合物a，小麦粉与水饱和的正丁醇溶液的质量比为1:（6~7），浸渍时间为1~2h；然后将混合物a于温度30~40℃下振荡浸提48~72 h，接着于3000~4000 rpm离心15~20 min，得到黄色透明的上清液；（2）将步骤（1）得到的上清液于温度35~40℃浓缩至4~5mL，得到浓缩液b；（3）将步骤（2）得到的浓缩液b用萃取剂c进行萃取，萃取剂c是由氯仿、甲醇和水按照体积比为2:1:0.75混合配置而成，萃取后分为上相层和下相层，取下相层黄色溶液备用；（4）步骤（3）中上相层的混合液接着采用萃取剂c进行萃取分相，下相层黄色溶液，上相层的混合液接着采用萃取剂c进行萃取，重复用萃取剂c操作2~4次，合并下相层黄色溶液得到混合液d，接着使用氮气将混合液d吹干得到混合物e；（5）取1.5~2.5 mL氯仿溶液洗涤混合物e，氮气吹干；（6）重复步骤（5）操作2~3次，得到物质f；（7）将步骤（6）得到的物质f溶于0.8~2mL甲醇中得到粗脂；（8）取200~500μL步骤（7）中得到的粗脂，在规格200mm * 200mm的硅胶板上距离底部1~3cm处点样，在展开剂的作用下展板，展开剂是由氯仿：甲醇：冰乙酸：丙酮：水按照体积比为10:2:2:2:1配置而成；（9）在紫外灯254 nm波长照射下能看到不同的斑点，在标准品的对照下，分别找出目的物单半乳糖甘油二脂和双半乳糖甘油二脂所在条带，挖下；（10）将目的物所在的条带分别置于不同离心管中，分别用10~20mL溶解液g于温度40℃下溶解5~10min，溶解液g是由氯仿与甲醇按照体积比为2:1配置而成，然后过滤，将滤液置于称重后的不同离心管中；（11）重复步骤（10），然后分别合并滤液；（12）将步骤（11）中得到的滤液用氮气吹干，对离心管进行称重；（13）用差量法分别计算出目的物单半乳糖甘油二脂及双半乳糖甘油二脂的重量；（14）分别将目的物溶解于1 M KOH‑乙醇溶液中，目的物与1 M KOH‑乙醇溶液的质量比为1:（1~2），接着于温度70℃保温20~30 min，然后加入3~4mL 1 mol/L 盐酸，接着于温度99℃保温15 min，最后加入7.5~14mL 1mol/L KOH；（15）分别移取2~6ml步骤（14）得到溶液中的上清液置于不同离心管中，于温度在60~80℃下蒸干，用3~4ml蒸馏水洗涤，向离心管中加入3~4ml菲林试剂，于温度99℃保温10min，加入4mL硫酸‑钼酸铵显色剂，定容至10 mL；（16）将步骤（15）的溶液分别在600nm波长下测定吸光值；（17）根据步骤（16）测定的吸光值按照半乳糖标线计算不同离心管中总糖含量；2）结合步骤1）中得到的各组分总糖含量，根据方程y1=0.0271x‑0.0288计算出双半乳糖甘油二脂的含量，其中x为总糖含量，y1为双半乳糖甘油二脂含量；结合步骤1）中得到的各组分总糖含量，根据方程y2=2.3567x‑1.2032计算出单半乳糖甘油二脂的含量，其中x为总糖含量，y2单半乳糖甘油二脂含量；所述含量单位为mg/g。