[发明专利]一种利用酶法转化生产L‑正缬氨酸的方法在审
申请号: | 201610979842.5 | 申请日: | 2016-11-08 |
公开(公告)号: | CN106520651A | 公开(公告)日: | 2017-03-22 |
发明(设计)人: | 饶志明;戚云龙;杨套伟;周俊平;郑俊贤;徐美娟;张显 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N9/06;C12N9/02;C12P13/08;C12R1/15;C12R1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 通过大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pXMJ19,将来源于Trigonopsis variabilis的D‑氨基酸氧化酶成功在C.glutamicum ATCC13032中表达。通过构建重组质粒pET‑28a(+)‑leudh和pET‑28a(+)‑fdh,将来源于Bacillus cereus和Candida boidinii的亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶成功在E.coli BL21中表达。以上述三株工程菌的粗酶液作为生物催化剂,以混合型DL‑正缬氨酸作为底物,同时确定了最佳的反应温度为30℃和pH为7.5。在最佳的转化条件下进行酶法动力学拆分生产L‑正缬氨酸。25h后转化液中的L‑正缬氨酸的含量为80.09g/L,L‑正缬氨酸产率为98.3%。本发明方法生产L‑正缬氨酸具有效率高,绿色环保,产品纯度高等优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 转化 生产 缬氨酸 方法 | ||
【主权项】:
一种具有D‑氨基酸氧化酶活性的谷氨酸棒杆菌重组菌,其特征在于,将Trigonopsis variabilis来源的D‑氨基酸氧化酶基因克隆至Corynebacterium glutamicum ATCC13032中获得的。
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