[发明专利]一种羽裂唇柱苣苔的组织培养方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种羽裂唇柱苣苔的组织培养方法。一种羽裂唇柱苣苔的组织培养方法，包括如下步骤外植体的消毒灭菌、不定芽的诱导、继代培养、生根培养和炼苗移栽。本发明的羽裂唇柱苣苔的组织培养方法具有后代长势良好，不定芽多，繁殖速度快、繁殖系数大，繁殖后代整齐一致，生根率高，移栽成活率高的优点。

主权项

一种羽裂唇柱苣苔的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)外植体的消毒灭菌：春季取羽裂唇柱苣苔的幼嫩叶片，先用0.1‑0.5％洗衣粉溶液浸泡25‑30min后在流水下冲洗30min，并用软毛刷轻轻刷洗叶片，然后转入超净工作台进行灭菌操作，先用棉球蘸取75％酒精拭擦叶片表面，无菌水冲洗2次，然后将叶片在75％酒精中浸泡10s，无菌水冲洗3次，再用0.1％氯化汞溶液处理6min，无菌水冲洗3次，最后再用0.1％氯化汞溶液处理6min，无菌水冲洗3次，氯化汞灭菌过程中轻轻震荡使氯化汞充分接触叶片；叶片切成2cm×2cm大小，接种在MS培养基，得到无菌叶片；(2)不定芽的诱导：将获得的无菌叶片切成1cm×1cm大小，并在叶片四周留有切口，接种在不定芽诱导培养基中，经过20‑25d的培养，从叶片四周的伤口诱导出不定芽；(3)继代培养：将获得的不定芽切取下来，接种在继代培养基中培养25‑30d，得到组培小苗；(4)生根培养：选取高度为1.5‑3.0cm的组培小苗，接种在生根培养基中培养18‑20d，得到组培生根苗；(5)炼苗移栽：将高度为2.5‑4.0cm的生根苗移出培养室后揭去组培瓶盖在自然条件下炼苗4‑5d；洗净培养基移栽到装有基质的50孔穴盘中；浇透定根水后，将移栽小苗置于有遮阳网的荫棚下，透光率为40‑50％，并采用间歇性喷雾系统控制空气湿度，每2h喷雾1次，喷雾时间每次40s，确保空气湿度85％以上，早晚浇透水各1次，移栽后7‑10d，即可成活。