[发明专利]一种新型基因克隆T-载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201610944866.7 | 申请日： | 2016-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN106399348B | 公开（公告）日： | 2019-05-31 |
| 发明（设计）人： | 尚广东;陈中秋 | 申请（专利权）人： | 南京师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 210023*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种新型基因克隆T‑载体及其构建方法和应用。具体为将两侧含XcmI酶切位点的ccdB基因克隆至pBluescript II(KS‑)，分别获得pLS3417和pLS3424，宿主菌为大肠杆菌DB3.1，XcmI酶切去除ccdB基因后获得T‑载体。T‑载体设计为通过保留T和A两个碱基而保持lacZα读码框结构，以提供α‑互补的功能。Taq DNA聚合酶扩增的PCR产物和T‑载体相连后，转化大肠杆菌DH10B，在含氨苄青霉素、异丙基硫代‑β‑D‑半乳糖苷5‑溴‑4氯‑3‑吲哚‑β‑D‑半乳糖苷的筛选平板上，含有自连载体的菌株呈现篮斑，而含重组克隆的菌株为白斑，以此筛选得到重组克隆。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 新型 基因 克隆 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种新型基因克隆T‑载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：将序列如SEQ ID NO.13或SEQ ID NO.14的两侧含XcmI酶切位点的ccdB基因分别克隆至pBluescript II(KS‑)，分别获得pLS3417和pLS3424，宿主菌为大肠杆菌DB3.1；XcmI酶切去除ccdB基因后获得T‑载体。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京师范大学，未经南京师范大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610944866.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
