[发明专利]一种辣椒籽抗菌肽的制备方法

摘要

本发明公开了生物活性肽的制备技术领域的一种辣椒籽抗菌肽的制备方法，该辣椒籽抗菌肽的制备方法包括如下步骤S1制备脱脂辣椒籽粉；S2提取辣椒籽粗蛋白质；S3辣椒籽粗蛋白酶解液的制备；S4制备辣椒籽抗菌肽粉末；S5制备辣椒籽抗菌肽采用收集器收集，用220nm波长检测，收集各峰冷冻干燥，得到辣椒籽抗菌肽，该发明提出的一种辣椒籽抗菌肽的制备方法，采用辣椒作为原材料，成本低廉，资源丰富，辣椒籽的蛋白质提取量高，资源利用率高，采用复合蛋白酶对辣椒籽蛋白质进行分解，水解度和肽得率达到最大，辣椒籽抗菌体的制备采用凝胶层析和去离子水洗脱，成本低廉，效率高，制备速度快。

主权项

一种辣椒籽抗菌肽的制备方法，其特征在于：该辣椒籽抗菌肽的制备方法包括如下步骤：S1：制备脱脂辣椒籽粉：以辣椒籽为原材料，将其粉碎过50目筛，将辣椒籽放置于滤纸纸筒内，放入提取器的抽提筒内，加入温度为25‑55℃的石油醚，40‑50℃加热回流提取6‑9小时，取出滤纸纸筒，脱去溶剂后得到脱脂辣椒籽粉，将脱脂辣椒籽粉过50目筛；S2：提取辣椒籽粗蛋白质：采用加碱溶解加酸沉淀法：控制温度在25‑35℃PH值控制在8.0‑9.0，混合时间20‑30min，料液比为20:1v/w，充分溶解后的提取液采用离心机进行离心，离心机转速控制在4000r/min‑4500r/min，离心时间15‑25min，收集上清液，上清液用0.1mol/L的HCL和0.1mol/L的NaOH调节PH值至3.5‑4.5，使得蛋白质沉淀，再使用离心机进行离心，离心机转速控制在4000r/min‑4500r/min，离心时间15‑25min，去除清液，收集沉淀，经过水洗、中和、冷冻和干燥得到辣椒籽粗蛋白质；S3：辣椒籽粗蛋白酶解液的制备：制备质量百分比为8％‑12％的辣椒籽粗蛋白水溶液，加入1.5％‑2.5％的复合蛋白酶，在温度45‑55℃下调节PH值6‑7，酶解时间为3‑5小时；S4：制备辣椒籽抗菌肽粉末：将步骤S3中所得到的辣椒籽粗蛋白酶解液采用沸水加热分解复合蛋白酶，加热时间为10‑15min，冷冻干燥得到辣椒籽抗菌肽粉末；S5：制备辣椒籽抗菌肽：将步骤S4中得到的辣椒籽抗菌肽粉末溶于去离子水中，过0.22微米铝膜，配置成浓度为15‑20mg/ml的溶液，取1ml溶液于凝胶过滤柱，用流速为0.2‑0.6ml/min的去离子水洗脱，采用收集器收集，用220nm波长检测，收集各峰冷冻干燥，得到辣椒籽抗菌肽。