[发明专利]从猪血中提取超氧化物歧化酶的方法及该超氧化物歧化酶有效
申请号: | 201610936334.9 | 申请日: | 2016-11-01 |
公开(公告)号: | CN106399271B | 公开(公告)日: | 2020-02-18 |
发明(设计)人: | 陈石良 | 申请(专利权)人: | 湖北宝迪农业科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 王闯 |
地址: | 432000 湖北省*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供了一种从猪血中提取超氧化物歧化酶的方法及该超氧化物歧化酶,以猪血为原料在提取、分离超氧化物歧化酶过程中,不使用任何有机溶剂,避免了环境污染和对酶活性的毒害,并使生产工艺简化。该方法,在超氧化物歧化酶纯化过程中,使用月桂酰氯作为保护剂,将超氧化物歧化酶保护起来,以避免热、酸、碱对超氧化物歧化酶的破坏作用,并结合热变性和等电点沉淀技术,使超氧化物歧化酶粗品得到进一步提纯和精制,具有生产周期短、成本低、更适合工业化规模生产的特点。所制备的超氧化物歧化酶,活性高,单位酶活力达到4500U/mg干粉以上。 | ||
搜索关键词: | 猪血 提取 超氧化物歧化酶 方法 | ||
【主权项】:
一种从猪血中提取超氧化物歧化酶的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)、在新鲜猪血中加入柠檬酸钠做抗凝处理,离心后收集血红细胞,即得到血球液,加水搅拌得到溶血液;(2)、用酸调节步骤(1)中的溶血液的pH至5.2~5.5,升温至60~65℃并保温,然后降温并进行过滤,得到滤液;(3)、用碱调节步骤(2)中的滤液的pH值至6.2~6.5,升温至70~75℃并保温,然后降温并过滤,得到滤液;(4)、将步骤(3)得到的滤液进行超滤浓缩,得到SOD粗酶溶液,将SOD粗酶溶液加热升温,用碱调整pH值至8.5~9.0,并滴加保护剂A并保温,保温后冷却,离心收集上清液,即得SOD酶液;(5)、向步骤(5)中的SOD酶液加入保护剂B,搅拌混匀后,冷冻干燥,得到SOD冻干粉。
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