[发明专利]一种基于SMRT测序技术的中成药生物物种组成成分监测方法在审
申请号: | 201610922312.7 | 申请日: | 2016-10-25 |
公开(公告)号: | CN106498050A | 公开(公告)日: | 2017-03-15 |
发明(设计)人: | 宋经元;辛天怡;徐志超;贾静 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院药用植物研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100193 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于SMRT的中成药生物物种组成成分监测方法,其包括如下步骤1)提取待检样品基因组DNA;2)以上述DNA为模板,扩增其ITS2序列和psbA‑trnH序列;3)基于Pacbio RSII测序平台,依照该平台标准操作流程,对上述PCR产物进行文库构建,并进行SMRT测序;4)应用SMRT Analysis Server 2.3.0软件对原始数据进行过滤,并基于RS_ReadsOfInsert.1操作流程获得环状一致性序列(circular‑consensus sequencing,CCS),用CD‑HIT软件将CCS序列进行聚类,最终获得可用于后续分析的ITS2和psbA‑trnH序列;5)将上述序列放入中药材DNA条形码鉴定系统(http//www.tcmbarcode.cn/china/),进行BLAST比对,获得物种鉴定结果。本发明能够实现对中成药生物物种组成成分的监测。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 smrt 技术 中成药 生物 物种 组成 成分 监测 方法 | ||
【主权项】:
一种基于SMRT测序技术的中成药生物物种组成成分的监测方法,其包括如下步骤:1)提取待检样品基因组DNA。2)以上述DNA为模板,PCR扩增其ITS2序列和psbA‑trnH序列。3)基于Pacbio RSII测序平台,依照该平台标准操作流程,对上述PCR产物进行文库构建,并进行SMRT测序。4)应用SMRT Analysis Server 2.3.0软件对原始数据进行过滤,并基于RS_ReadsOfInsert.l操作流程获得环状一致性序列(circular‑consensus sequencing,CCS),用CD‑HIT软件将CCS序列进行聚类,最终获得可用于后续分析的ITS2和psbA‑trnH序列。5)将上述序列放入中药材DNA条形码鉴定系统(http://www.tcmbarcode.cn/china/),进行BLAST比对,获得物种鉴定结果。
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