[发明专利]一种固定化酵母菌制备烟用紫罗兰提取物的方法

摘要

本发明提供一种固定化酵母菌制备烟用紫罗兰提取物的方法。所述制备方法的具体步骤为：(1)取紫罗兰花加水采用微波提取多次，合并提取液，得到紫罗兰提取物A；(2)采用酵母菌接种到肉汤培养基中培养离心后得到湿菌体，将湿菌体加入到聚乙烯醇和海藻酸钠的混合溶液中，并用含有CaCl2的硼酸饱和溶液和饱和Na2SO4溶液中交联得固定化乳酸菌小球；(3)将紫罗兰提取物A与固定化乳酸菌小球混合后发酵，过滤得澄清发酵液，依次冷冻干燥、醇沉、过滤、浓缩、分子蒸馏后，取轻组分为紫罗兰提取物提取物。本发明添加到卷烟中具有丰富烟香，甜香韵和花香韵更加明显，烟香更加透发，改善喉部舒适性。

主权项

一种固定化酵母菌制备烟用紫罗兰提取物的方法，其特征在于具体包括以下步骤：(1)取紫罗兰花，加入其重量3～5倍的水，在55～70℃下微波提取2～3次，每次提取时间为2～3小时，提取完后冷却至室温，并过滤得到提取液，合并多次提取液，得到紫罗兰提取物A；(2)将酵母菌接种到肉汤培养基中，在温度37℃、搅拌转速为50rpm的条件下培养48小时，取培养液于8000rpm下离心，离心后的湿菌体备用；(3)酵母菌的聚乙烯醇—海藻酸钠固定化：采用聚乙烯醇水溶液与海藻酸钠水溶液配制含质量百分比6％～10％的聚乙烯醇和质量百分比1％～3％的海藻酸钠的混合溶液，然后向混合溶液中加入总溶液体积的1～3％的步骤(2)中制备的酵母菌湿菌体，配制成混合液，用蠕动泵经过1～5mm孔径的针头将配制好的混合液逐滴加入到CaCl2的质量百分比为1～3％的硼酸饱和溶液中，交联1h形成小球，然后将小球取出再加入饱和Na2SO4溶液中交联3‑5h，得PVA‑SA固定化酵母菌小球，然后采用无菌水冲洗，烘干备用；(4)将步骤(1)中制备的紫罗兰提取物A与步骤(3)中制备的固定化酵母菌小球按照质量比5～10:1混合，在温度为15～20℃，搅拌转速为1～5rpm的条件下发酵3～5d；然后置于4℃冷柜中保存7～14d；(5)将步骤(4)发酵后发酵液过滤，得澄清发酵液，并将冷藏后的发酵液进行冷冻干燥，其冷冻干燥的料液厚度为1～2厘米，真空度为10Pa，干燥时间为6～12h；(6)取步骤(5)中冷冻干燥后的发酵液，加入其质量2～4倍的80～95％酒精溶液，沉淀24～48小时，过滤取上清液在压力为0.1MPa，温度为45℃的条件下浓缩至相对密度为1.25～1.30，然后在浓缩物中加入丙二醇，得紫罗兰提取物B，所述丙二醇的加入量为总质量的20％；(7)将步骤(6)中的紫罗兰提取物B，在压力0.1～10Pa，进料温度为55℃～75℃，进料速度为1～20ml/min，刮板转速为80～120rpm的条件下进行分子蒸馏，取轻组分为紫罗兰提取物。