[发明专利]一种茄子花药培养直接获得植株的方法和培养基

摘要

本发明一种茄子花药培养直接获得植株的方法和培养基，属于植物组织培养技术领域。所述培养方法包括：(1)、新鲜花蕾的选取；(2)、花蕾的表面消毒、无菌花药的获得；(3)、将单核靠边期的无菌花药接种于花药培养固体培养基中，33～37℃黑暗培养2～8天，转至25‑28℃光照培养30‑40天；(4)、将子叶型胚状体转至健苗生根固体培养基中继续培养，长成完整植株。本发明的培养方法具有以下优点：本发明所采用的培养方法简单易行，由花药离体培养直接诱导胚状体获得单倍体植株，避免了花药培养诱导形成的愈伤组织转接至分化培养基，再诱导植株再生的过程；也避免了由花药壁等二倍体体细胞参与愈伤组织形成而出现的染色体倍性混杂现象。

主权项

1.一种茄子花药培养直接获得植株的方法，包括下述步骤：(1)、胚状体的获得：将单核靠边期的无菌花药接种于花药培养固体培养基中，33～37℃黑暗培养2～8天，转至25‑28℃光照培养30‑40天，可见胚状体由裂开的花药壁内萌发出来；所述花药培养固体培养基的组成为：950mg/L KNO3、825mg/L NH4NO3、332.02mg/L CaCl2、180.54mg/L MgSO4、170mg/L KH2PO4、36.7mg/L FeNaEDTA、0.83mg/L KI、6.2mg/L H3BO3、16.9mg/LMnSO4·H2O、8.6mg/L ZnSO4·7H2O、0.25mg/L Na2MoO4·2H2O、0.025mg/L CuSO4·5H2O、0.025mg/L CoCl2·6H2O、100mg/L肌醇、5mg/L烟酸、2mg/L甘氨酸、0.5mg/L盐酸硫氨(维生素B1)、0.5mg/L盐酸吡哆素(维生素B6)、0.5mg/L叶酸、0.05mg/L生物素、800mg/L谷氨酰胺、100mg/L丝氨酸、30mg/L谷胱甘肽(GSH)、0.1～1mg/L KT、0.1～1mg/L IAA、0.01～0.05mg/L NAA、0.1％～0.3％活性炭、3％～6％蔗糖和0.6％～0.8％琼脂；固体培养基的pH值为5.8；(2)、再生单倍体植株的获得：当胚状体生长到子叶型胚状体阶段，将其转接至健苗生根固体培养基中继续培养，长成完整植株；所述健苗生根固体培养基的组成为：1900mg/L KNO3、1650mg/L NH4NO3、332.02mg/L CaCl2、180.54mg/L MgSO4、170mg/L KH2PO4、36.7mg/L FeNaEDTA、0.83mg/L KI、6.2mg/L H3BO3、16.9mg/L MnSO4·H2O、8.6mg/L ZnSO4·7H2O、0.25mg/L Na2MoO4·2H2O、0.025mg/L CuSO4·5H2O、0.025mg/L CoCl2·6H2O、100mg/L肌醇、0.5mg/L烟酸、2mg/L甘氨酸、0.1mg/L盐酸硫氨(维生素B1)、0.5mg/L盐酸吡哆素(维生素B6)、0.01～0.1mg/L KT、0.1～0.5mg/L IBA、3％蔗糖和0.8％琼脂；健苗生根固体培养基的pH值为5.8。