[发明专利]一种肠道病毒属病毒筛查和分型的引物及检测方法

摘要

本发明公开了一种肠道病毒属病毒筛查和分型的引物及检测方法，引物的序列为：CODEHOP外引物序列和CODEHOP内引物序列以及20种病毒的引物序列。检测方法包括：RNA的提取；一步RT‑PCR；巢式PCR；用1.5％浓度琼脂糖凝胶电泳，判定肠道病毒阳性和分型结果。本发明设计了一对肠道病毒属一致‑简并引物，并在该引物扩增片段内部，设计了一对短片段的一致‑简并引物和20种不同肠道病毒的分型引物，结合巢式RT‑PCR技术技术，建立了可用于肠道病毒属的不同基因型病毒筛查和分型的简并引物巢式RT‑PCR方法，具有灵敏度高、特异性强，适用于低病毒含量样品的肠道病毒监测和种类鉴定的特点。

主权项

一种肠道病毒属病毒筛查和分型的引物，其特征在于，所述肠道病毒属病毒筛查和分型的引物的序列包括：CODEHOP外引物序列和CODEHOP内引物序列以及20种病毒的引物序列；CODEHOP外引物序列SEQ ID NO：1；CODEHOP内引物序列SEQ ID NO：2；Enterovirus 71引物序列SEQ ID NO：3；Enterovirus B84引物序列SEQ ID NO：4；Enterovirus D68引物序列SEQ ID NO：5；Echovirus E6引物序列SEQ ID NO：6；Coxsackievirus A16引物序列SEQ ID NO：7；Coxsackievirus A8引物序列SEQ ID NO：8；Coxsackievirus B2引物序列SEQ ID NO：9；Coxsackievirus B3引物序列SEQ ID NO：10；Coxsackievirus A12引物序列SEQ ID NO：11；Coxsackievirus_B4引物序列SEQ ID NO：12；Coxsackievirus A6引物序列SEQ ID NO：13；Coxsackievirus A4引物序列SEQ ID NO：14；Coxsackievirus A24引物序列SEQ ID NO：15；Coxsackievirus A10引物序列SEQ ID NO：16；Human poliovirus 1引物序列SEQ ID NO：17；Rhinovirus C引物序列SEQ ID NO：18；Human echovirus 19引物序列SEQ ID NO：19；Human enterovirus 70引物序列SEQ ID NO：20；Porcine enterovirus 9引物序列SEQ ID NO：21；Possum enterovirus W1引物序列SEQ ID NO：22。