[发明专利]利用响应面法优化胶原蛋白的超声辅助酸提方法

摘要

本发明涉及胶原蛋白的提取方法。更具体地说，本发明涉及一种利用响应面法优化胶原蛋白的超声辅助酸提方法，包括：取新鲜或冷冻的中华鳖裙边切碎后进行除杂处理；取除杂后的样品以料液比为1:10～30加入0.3～0.6mol/L的乙酸溶液，并置于超声反应器中进行间歇式超声提取，每超声第一预定时间后，间歇第二预定时间，如此反复，离心后取上清液，再向上清液中添加NaCl，静置盐析后过滤，蛋白沉淀用同浓度的乙酸复溶后，依次对乙酸和蒸馏水透析，最后冷冻干燥得到样品；第一预定时间小于等于第二预定时间。本发明提供了一种提取效率高，胶原蛋白溶解度好，原料利用价值和胶原蛋白利用率均较高的胶原蛋白超声辅助酸提方法。

主权项

一种利用响应面法优化胶原蛋白的超声辅助酸提方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、取新鲜或冷冻的中华鳖裙边切碎后以料液比为1:10～30加入质量分数为1.0～3.0％的NaCl溶液，于20℃下搅拌6～12h，然后在5000～10000rpm下高速匀浆1～3min后，收集一次沉淀，以料液比为1:10～30加入0.3～0.6mol/L的Na2CO3溶液，于20℃下搅拌6～12h，然后在5000～10000rpm下高速匀浆1～3min后，收集二次沉淀，以料液比为1:20～30加入0.2～0.4mol/L的EDTA水溶液浸泡除杂，于20℃下搅拌6～12h，然后在5000～10000rpm下高速匀浆1～3min，收集三次沉淀，用蒸馏水反复洗涤，充分沥干后备用，再加入与质量分数为1.0～3.0％的NaCl溶液同量的质量分数为5～20％的异丙醇溶液，于20℃浸泡12～30h，然后在5000～10000rpm下高速匀浆1～3min，收集四次沉淀，然后用蒸馏水反复洗涤，充分沥干后备用；步骤二、取步骤一中充分沥干后的四次沉淀，以料液比为1:10～30加入0.3～0.6mol/L的乙酸溶液，并置于超声反应器中进行间歇式超声提取，每超声第一预定时间后，间歇第二预定时间，如此反复，超声功率为50～300W，超声时间为50～70min，然后在1000～3000rmp下离心3～6min后取上清液，再向上清液中添加NaCl，直至盐浓度为0.9mol/L，静置盐析18～30h后过滤，蛋白沉淀用0.3～0.6mol/L的乙酸复溶后，依次对0.1mol/L的乙酸和蒸馏水透析，最后冷冻干燥得到样品；其中，所述第一预定时间小于等于所述第二预定时间。