[发明专利]一种基于滚环扩增的串联G-四链体-血红素DNA酶免标记信号放大方法有效
| 申请号： | 201610772798.0 | 申请日： | 2016-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN106367497B | 公开（公告）日： | 2020-02-04 |
| 发明（设计）人： | 张何;傅昕;陈人可 | 申请（专利权）人： | 湖南工程学院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/682;C12Q1/10;C12R1/42 |
| 代理公司： | 11569 北京高沃律师事务所 | 代理人： | 李娜 |
| 地址： | 411101 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本申请提供了一种基于滚环扩增的串联G‑四链体‑血红素DNA酶免标记信号放大方法，包括以下步骤：1)采用亲和洗脱液和生物素化捕获探针对链霉亲和素功能化微球进行处理，得到预处理微球；2)将样品基因组DNA进行循环扩增和纯化，得到环化DNA；3)将所述步骤1)得到的预处理微球和所述步骤2)得到的环化DNA混合后进行滚环扩增，得到滚环扩增产物；4)将所述步骤3)得到的滚环扩增产物与血红素结合，得到信号放大的滚环扩增产物，所述信号放大的滚环扩增产物形成放大的检测信号；所述步骤1)和步骤2)之间没有时间顺序限定。本发明的方法对沙门氏菌的检测限为0.03pmol/L，检测成本低、操作简单、灵敏度极高、检测快速且可通过肉眼判断样品中是否含有沙门氏菌。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 扩增 串联 四链体 血红素 dna 标记 信号 放大 方法 | ||
【主权项】：
1.一种非诊断目的的基于滚环扩增的串联G-四链体-血红素DNA酶免标记信号放大方法，包括以下步骤：/n1)采用亲和洗脱液和生物素化捕获探针对链霉亲和素功能化微球进行处理，得到预处理微球；/n2)将样品基因组DNA进行循环扩增和纯化，得到环化DNA；/n3)将所述步骤1)得到的预处理微球和所述步骤2)得到的环化DNA混合后进行滚环扩增，得到滚环扩增产物；/n4)将所述步骤3)得到的滚环扩增产物与血红素结合，得到信号放大的滚环扩增产物，所述信号放大的滚环扩增产物形成放大的检测信号；/n所述步骤1)和步骤2)之间没有时间顺序限定；/n所述步骤2)中循环扩增的体系为65～80μL ddH
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