[发明专利]利用一阶导数紫外分光光度法测定壳寡糖脱乙酰度的方法

摘要

本发明提供一种利用一阶导数紫外分光光度法测定壳寡糖脱乙酰度的方法，包括如下步骤：1)以浓度为0.3‑1.0mol/L的盐酸溶液作为空白溶剂，建立标准曲线；2)取壳寡糖样品，用空白溶剂溶解后，以空白溶剂为参比，在200‑206nm波长处测定其吸光度值，根据标准曲线计算其脱乙酰度。本发明提供的利用一阶导数紫外分光光度法测定壳寡糖脱乙酰度的方法，操作简单易行，可消除共存物、浊度及色度的干扰，准确度和精密度高，实用性强。本发明提供的壳寡糖脱乙酰度的测定方法简单、快速、准确，有助于壳寡糖制备过程中的质量控制。

主权项

一种利用一阶导数紫外分光光度法测定壳寡糖脱乙酰度的方法，其特征在于：包括如下步骤：1)以浓度为0.3‑1.0mol/L的盐酸溶液作为空白溶剂，配置一系列浓度的N‑乙酰‑D‑葡萄糖胺标准溶液，以空白溶剂为参比，测定不同浓度的N‑乙酰‑D‑葡萄糖胺标准溶液在200‑206nm波长范围内的紫外吸光度值A，根据N‑乙酰‑D‑葡萄糖胺的浓度和ΔA/Δλ绘制标准曲线，其中，ΔA＝Aλ+1—Aλ‑1，λ为203‑205nm，Δλ＝2nm；2)取壳寡糖样品，用空白溶剂溶解后，以空白溶剂为参比，在200‑206nm波长处测定其紫外吸光度值，根据标准曲线计算壳寡糖样品中N‑乙酰‑D‑葡萄糖胺的浓度，并根据以下公式计算壳寡糖样品的脱乙酰度：式中，D.D％为脱乙酰度，％；C1为壳寡糖样品浓度，μg/mL；C2为壳寡糖样品中N‑乙酰‑D‑葡萄糖胺的浓度，μg/mL；M1为203，N‑乙酰‑D‑葡萄糖胺的分子量；42为N‑乙酰‑D‑葡萄糖胺的分子量与D‑氨基葡萄糖胺的分子量之差。