[发明专利]一种使用全悬浮技术生产猪细小病毒病疫苗的方法

摘要

本发明涉及一种使用全悬浮技术生产猪细小病毒病疫苗的方法。本发明涉及的ST细胞全悬浮培养的工艺，其关键技术在于ST细胞全悬浮驯化成功后可在生物反应器进行猪细小病毒病病毒的大规模培养，具有操作简单、可控性强、培养效率和自动化程度高、不需要载体等优势，为细胞或疫苗的规模化生产提供了一条新的路径。

主权项

1.一种使用全悬浮技术生产猪细小病毒病疫苗的方法，其特征在于其制备方法包括细胞培养、更换细胞培养液并接毒和收获工序，即先将ST‑1株细胞用摇瓶进行悬浮培养扩增后接入生物反应器进行悬浮培养，当细胞生长至病毒接种密度后将细胞培养液的1/3换成新的培养液并接入猪细小病毒种子液，在生物反应器内继续培养至结束后收获病毒液，经灭活后，加入油佐剂配成W/O/W双相油乳剂灭活疫苗；所述ST‑1株，是由猪睾丸传代细胞系ST细胞系经贴壁培养阶段的低血清驯化过程和低血清培养基的悬浮驯化过程而获得，该株细胞被命名为猪睾丸细胞系悬浮适应株ST‑1株，该株细胞已于2016年08月23日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.12698；所述的细胞培养液系指低血清细胞培养液，其血清含量(V/V)为：0.5％～2％。