[发明专利]一种筛选和研究线粒体疾病致病基因果蝇模型的构建方法及其应用

摘要

本发明提供了一种筛选和研究线粒体疾病致病基因果蝇模型的构建方法及其应用，本发明的方法中使果蝇模型翅膀神经细胞中的线粒体表达第一荧光蛋白；并且使果蝇模型翅膀神经细胞膜表达第二荧光蛋白，通过线粒体定位的第一荧光蛋白标记线粒体，通过神经细胞膜定位的第二荧光蛋白标记神经细胞，就可以实现体内条件下对神经系统内线粒体功能的研究。使用该方法构建的果蝇转基因模型能够简单、方便地用于筛选和研究线粒体致病基因，能够满足线粒体致病基因筛选所要求的高通量、经济性强和时间短的要求。

主权项

1.一种构建转基因果蝇模型的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：(1)使所述果蝇模型翅膀神经细胞中的线粒体表达第一荧光蛋白；和(2)使所述果蝇模型翅膀神经细胞膜表达第二荧光蛋白；从而构建出所述转基因果蝇模型；其中，所述第二荧光蛋白的荧光与所述第一荧光蛋白的荧光不同；所述第一荧光蛋白为绿色荧光蛋白；并且，所述步骤(1)中包括步骤：(1.1)将dpr‑Gal4基因型果蝇与UAS‑mitoGFP基因型的果蝇杂交，然后挑选出子代中同时含有这两个转基因的处女果蝇；(1.2)将步骤(1.1)获得的处女果蝇与w¹¹¹⁸果蝇进行杂交，挑选杂交后子代中眼睛颜色最深的雄果蝇；(1.3)将步骤(1.2)中获得的雄果蝇分别与Sco/Cyo基因型果蝇进行单独杂交；(1.4)确定步骤(c)杂交成功以后，验证所述雄果蝇是否携带dpr‑Gal4和UAS‑mitoGFP基因，如果所述雄果蝇同时携带dpr‑Gal4和UAS‑mitoGFP两个转基因，便将该雄果蝇的子代收集起来；由此构建出绿色荧光蛋白标记神经细胞线粒体的dpr‑Gal4,UAS‑mitoGFP/Cyo基因型果蝇。