[发明专利]一种两面针的组织培养快繁方法

摘要

本发明公开了一种两面针的组织培养快繁方法，特征是通过组织培养技术获得株系稳定的种苗的育苗方法。本发明以两面针带节藤茎为外植体，通过诱导不定芽、丛生芽增殖培养、试管苗生根以及炼苗移栽等阶段实现了两面针种苗的组织培养快速繁殖。解决了两面针大规模种植的种苗供应，也为以两面针药材作原料的药品生产提供了原料保证。

主权项

一种两面针的组织培养快繁方法，其特征在于包括以下工艺步骤：步骤（1）诱导不定芽：选取两面针带节藤茎为外植体,经75%酒精消毒16秒种后，用无菌水冲洗6次后置于0.4%的升汞溶液中消毒32分钟，然后用无菌水冲洗7次，经无菌滤纸吸干水分后接种到诱导培养基上,在29℃条件下全暗培养，直至诱导形成不定芽；步骤（2）丛生芽增殖培养：将不定芽接种到增殖培养基上进行增殖培养，接种后置于每天光照16小时，光照强度为1600lx，培养温度为29℃的条件下培养，19天转接一次；步骤（3）试管苗生根：将长至5cm的丛生芽分切接种到生根培养基上进行诱导生根，接种后先在29℃条件下全暗培养15天，然后每天光照16小时，光照强度为3100lx，培养温度为29℃的条件下培养至生根；步骤（4）炼苗移栽：将长至5cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开自然光照下炼苗8天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由泥炭土和河沙（1：1）混合成的基质并定植于大田中。