[发明专利]一种测定多不饱和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸组成的方法

摘要

本发明公开了一种测定多不饱和脂肪酸甘三酯中sn‑2位脂肪酸组成的方法，其包括，利用脂肪酶Lipozyme 435结合超声辅助醇解富含多不饱和脂肪酸甘三酯；将得到的超声辅助酶法醇解产物经高效液相进行分离，得到sn‑2单甘油酯并收集；将所得的sn‑2单甘油酯进行甲酯化衍生处理，获取衍生物；气相色谱检测所得的衍生产物，测定甘油三酯中sn‑2位脂肪酸的组成及含量。本发明提供的富含多不饱和脂肪酸甘三酯超声辅助醇解反应及sn‑2单甘酯分离和甘三酯sn‑2位脂肪酸组成的测定方法，准确度和灵敏度高、重现性好、稳定性强。

主权项

1.一种测定多不饱和脂肪酸甘三酯中sn‑2位脂肪酸组成的方法，其特征在于：包括，利用脂肪酶Lipozyme 435结合超声辅助醇解富含多不饱和脂肪酸甘三酯；将得到的超声辅助酶法醇解产物经高效液相进行分离，得到sn‑2单甘油酯并收集；将所得的sn‑2单甘油酯进行甲酯化衍生处理，获取衍生物；气相色谱检测所得的衍生产物，测定甘油三酯中sn‑2位脂肪酸的组成及含量；所述超声辅助醇解中，超声波功率为200～400W；所述高效液相进行分离，其条件为：硅胶柱，柱温：25～45℃；流动相：A柱正己烷:异丙醇＝99:1；B柱异丙醇:正己烷:乙酸＝1:1:0.2；流速0.5～1.5mL/min；进样量50μL；所述多不饱和脂肪酸甘三酯来源于寇氏隐甲藻油、裂殖壶藻油、吾肯氏壶藻油、深海鱼油中的一种；所述气相色谱，其采用色谱柱SP‑2560，100m×0.25mm，0.20μm的毛细管柱；所述气相色谱检测所得的衍生产物，其条件为：初始温度80～100℃，保持2‑5min，以(5～15)℃/min升至160～200℃，保持2～5min，再以(5～15)℃/min升温至210～230℃；载气为纯度≥99.99％的氮气；载气流速为1.0mL/min；分流比100～50∶1；气化室温度250～300℃；进样体积1.0μL。