[发明专利]一种酶法辅助提取桂圆多糖的方法

摘要

本发明公开了一种酶法辅助提取桂圆多糖的方法，采用加入α‑L‑鼠李糖苷酶酶制剂与桂圆和水混合进行酶解，并进行水提和过滤，将上清液进行旋转蒸发浓缩及醇沉之后得到桂圆多糖。本发明的技术效果是：加入α‑L‑鼠李糖苷酶酶制剂可以提高桂圆多糖的提取率，可使加酶处理的提取率与不加酶处理的提取率相比提高至24.66%；与其他方法相比，酶法辅助提取多糖条件温和，操作方便，经济节约，效果明显，为桂圆多糖的商品化应用提供了基础。

主权项

1.一种酶法辅助提取桂圆多糖的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、酶液发酵：将含有α‑L‑鼠李糖苷酶基因的毕赤酵母GS115接种到YPD培养基中进行活化后，转入BMGY培养基中继续活化，收集OD600为2.0‑3.0的菌体，并转入到BMMY培养基中，置于30℃诱导表达；每隔24h加无菌甲醇诱导表达7天，离心收集酶液；步骤二、酶制剂制备：设定喷雾压力为0.2Mpa，进风温度为135℃，进风速度为4m3/min，进料速率为800ml/h，100mLα‑L‑鼠李糖苷酶酶液加入15g的麦芽糊精，进行喷雾干燥制备α‑L‑鼠李糖苷酶酶制剂；步骤三、酶处理：将桂圆浸泡于2‑5倍水中，再添加0.5％‑2％的α‑L‑鼠李糖苷酶酶制剂，并在50℃‑60℃中温浴0.5h‑1.5h；步骤四、水提：将步骤三得到的溶液进行两次水提，第一次加水量为桂圆质量的1‑8倍，水提时间为0.5h‑2.5h；第二次加水量为桂圆质量的1‑5倍，水提时间为0.5h‑1.5h；步骤五、浓缩及醇沉：将步骤四得到的桂圆多糖水提液通过旋转蒸发浓缩，然后加入3倍浓缩液体积的无水乙醇，静置15h，然后过滤得到不溶物，将不溶物干燥后即可得到桂圆多糖；所述步骤三中，水与桂圆的质量比为2：1；所述步骤三中，酶制剂的添加量为1％；所述步骤三中，酶解温度为50℃，酶解时间为1.5h；所述步骤四中，水提两次，第一次加水量为桂圆质量的8倍，水提时间为0.5h；第二次加水量为桂圆质量的5倍，水提时间为0.5h。