[发明专利]一种双柱液相色谱串联质谱法对卷烟烟气中亚硝胺释放量的分析方法

摘要

本发明提供一种双柱液相色谱串联质谱法对卷烟烟气中亚硝胺释放量的分析方法，对卷烟烟气进行样品前处理，采用双柱液相色谱串联质谱系统对前处理所得待测样品进行定性定量分析，所述双柱液相色谱串联质谱系统包括有第一维液相色谱泵、第一分离柱、第二维液相色谱泵、第二分离柱、质谱装置。本发明进一步提供了一种双柱液相色谱串联质谱系统。本发明提供一种双柱液相色谱串联质谱法对卷烟烟气中亚硝胺释放量的分析方法，样品前处理简单，检测效率高，能有效地去除烟气中干扰物质，取得优异的分离度、灵敏度，检测结果准确可靠。

主权项

1.一种双柱液相色谱串联质谱法对卷烟烟气中亚硝胺释放量的分析方法，对卷烟烟气进行样品前处理，采用双柱液相色谱串联质谱系统对前处理所得待测样品进行定性定量分析，所述双柱液相色谱串联质谱系统包括有第一维液相色谱、第二维液相色谱、质谱装置，所述第一维液相色谱包括有第一分离柱，所述第二维液相色谱包括有第二分离柱；所述卷烟烟气中亚硝胺包括有N‑亚硝基去甲基烟碱、4‑(甲基亚硝基氨基)‑l‑(3‑比啶基)‑1‑丁酮、N‑亚硝基假木贼碱和N‑亚硝基新烟草碱；所述样品前处理包括以下步骤：1)选取卷烟烟支，点燃后进行抽吸，采用滤片捕集方式捕集卷烟烟气；2)将滤片进行超声萃取后过膜，即得待测样品；所述采用双柱液相色谱串联质谱系统对前处理所得待测样品进行定性定量分析，包括以下步骤：A)配制标准样品：配制混合标准储备溶液、内标溶液和混合标准溶液；B)样品定性检测：分别将步骤A)配制的标准样品和经样品前处理后待测样品进行双柱液相色谱串联质谱系统检测，在第一维液相色谱作用下，通过第一分离柱进行馏分后，在第二维液相色谱作用下，由所述第二分离柱进行分离，再由所述质谱装置进行测定，比较保留时间、质谱扫描进行定性，确定待测样品中4种亚硝胺成分；C)样品定量检测：分别将步骤A)配制的标准样品和经样品前处理后待测样品进行双柱液相色谱串联质谱系统检测，在第一维液相色谱作用下，通过第一分离柱进行馏分后，在第二维液相色谱作用下，由所述第二分离柱进行分离，再由所述质谱装置进行测定，采用内标标准曲线法进行MRM定量，获得待测样品中4种亚硝胺成分的含量；步骤B)或C)中，所述第一分离柱为强阳离子交换色谱柱；所述第一维液相色谱的条件为：第一维液相色谱：正相液相色谱；柱温：25‑35℃；流速：0.5‑1.5mL/min；进样量：5‑15μl；第一维流动相A相：5‑15mmol/L KH2PO4+1‑10mmol/L H3PO4+80‑90％H2O+10‑20％CH3CN，pH＝2‑4；第一维流动相B相：5‑15mmol/L KH2PO4+1‑10mmol/L H3PO4+0.1‑1.0mol/L KCl+80‑90％H2O+10‑20％CH3CN，pH＝2‑4；梯度洗脱；步骤B)或C)中，所述第二分离柱为Trap捕集柱，所述Trap捕集柱为C18柱；所述第二维液相色谱的条件为：第二维液相色谱：反相液相色谱；柱温：25‑35℃；流速：0.2‑0.3mL/min；进样量：5‑15μl；第二维流动相A相：1‑10mmol/L NH4Ac+92‑98％H2O+2‑8％CH3CN；第二维流动相B相：1‑10mmol/L NH4Ac+92‑98％CH3CN+2‑8％H2O；梯度洗脱；步骤B)或C)中，所述质谱装置的条件为：质谱：Agilent Technologies 6460 Triple Quad MS三重四极杆质谱；电离方式：电喷雾离子源；扫描方式：多反应监测MRM；喷雾电压为：5000V；雾化气压力为：482.6kPa；气帘气压力为：206.7kPa；辅助雾化气压力为：482.6kPa；离子源温度为：500℃；清洗进样针程序：needle wash 30s；质谱流路切换：从10min开始扫描，28min结束；所述第一维液相色谱的梯度洗脱的具体程序为：0‑5min，A相：B相体积比为100：0‑90：10；5‑5.1min，A相：B相体积比为90：10‑60：40；5.1‑15min，A相：B相体积比为60：40‑0：100；15‑15.1min，A相：B相体积比为0：100‑100：0；15.1‑40min，A相：B相体积比为100：0‑100：0；所述第二维液相色谱的梯度洗脱的具体程序为：0‑10min，A相：B相体积比为100：0‑100：0；10‑20min，A相：B相体积比为100：0‑0：100；20‑22min，A相：B相体积比为0：100‑0：100；22‑22.1min，A相：B相体积比为0：100‑100：0；22‑25min，A相：B相体积比为100：0‑100：0。