[发明专利]一种制备MC4R基因敲除猪的方法有效
| 申请号： | 201610587597.3 | 申请日： | 2016-07-22 |
| 公开（公告）号： | CN106191064B | 公开（公告）日： | 2019-06-07 |
| 发明（设计）人： | 李秋艳;郝海阳;韩建永;邹云龙;付怡静;李志远;尹志安;罗洁 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10;C12N15/877;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及基因工程和遗传修饰领域，具体地说，涉及利用CRISPR/Cas9系统对MC4R基因进行编辑，并通过体细胞核移植技术获得MC4R基因敲除猪。本发明首次针对猪MC4R基因的CDS区的两个位点(MC4R基因CDS区的6133‑6152bp序列和7127‑7146bp序列)设计sgRNA，并借助CRISPR‑Cas9系统对两个位点同时进行切割，实现了MC4R基因的大片段删除，并且获得了大片段删除的敲除猪个体，为研究猪MC4R基因提供了一种切实可行的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 制备 mc4r 基因 方法 | ||
【主权项】：
1.一种制备MC4R基因敲除细胞的方法，其特征在于，将含有序列为5’‑ttctggaaccgcagcaccta‑3’的sgRNA的CRISPR/Cas9打靶载体，与含有序列为5’‑gactttctccttacacagtc‑3’的sgRNA的CRISPR/Cas9打靶载体共转染细胞，从而敲除细胞的MC4R基因；所述细胞来源于猪。
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