[发明专利]构建能表达阳性菌多糖的阴性菌的方法及其所得突变体有效
| 申请号： | 201610581114.9 | 申请日： | 2016-07-22 |
| 公开（公告）号： | CN106191091B | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | 孔庆科;刘琼;刘青;韩月 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/42 |
| 代理公司： | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙) 51238 | 代理人： | 黎祖琴 |
| 地址： | 611130 四川省成*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种构建能表达革兰氏阳性菌多糖的革兰氏阴性菌的方法，其包括步骤：将革兰氏阳性菌多糖低拷贝表达质粒转化入缺失了asd以及rfbP基因的革兰氏阴性菌中，通过平衡致死系统筛选，得到能够产生革兰氏阳性菌多糖的革兰氏阴性菌。本发明还提供了由上述方法制备得到的能够产生革兰氏阳性菌多糖的革兰氏阴性菌。本发明还提供了一株鼠伤寒沙门氏菌Salmonella enterica serovar Typhimurium P0005突变体，分类命名为Salmonella enterica subsp.enterica serovar Typhimurium P0005，保藏号为CCTCC NO：M 2016344。本发明能够使得革兰氏阴性菌表达革兰氏阳性菌的多糖，同时本发明方法不含任何抗性标记，符合后续疫苗以及其他应用的生物安全需求。 | ||
| 搜索关键词： | 构建 表达 阳性 多糖 阴性 方法 及其 所得 突变体 | ||
【主权项】：
1.一种构建能表达革兰氏阳性菌多糖的革兰氏阴性菌的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：将含有革兰氏阳性菌多糖的低拷贝表达质粒转化入缺失了asd以及rfbP基因的革兰氏阴性菌中，通过平衡致死系统筛选，得到能够产生革兰氏阳性菌多糖的革兰氏阴性菌；所述革兰氏阳性菌多糖低拷贝表达质粒为肺炎链球菌荚膜多糖低拷贝表达质粒；所述肺炎链球菌荚膜多糖低拷贝表达质粒含有如SEQ ID No：1所示核苷酸序列的肺炎链球菌6A血清型荚膜多糖基因簇；所述革兰氏阴性菌为鼠伤寒沙门氏菌。
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