[发明专利]一种建立农杆菌介导观音莲高效转染体系的方法有效
| 申请号： | 201610505628.6 | 申请日： | 2016-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN106119277B | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 陈海涛;生承晔;张业胜;董扬 | 申请（专利权）人： | 云南纳博生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/32 |
| 代理公司： | 53115 昆明今威专利商标代理有限公司 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650502 云南*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开一种建立农杆菌介导观音莲高效转染体系的方法，所述方法包括以下步骤：侵染和共培养阶段：将观音莲无菌苗叶片块放入三角瓶中，倒入农杆菌菌液，三角瓶口密封进行侵染，侵染后倒去菌液，将叶片晾干，转接到共培养培养基中进行暗培养得到愈伤组织；筛选阶段：将共培养获得的愈伤组织转接到筛选培养基中进行两次筛选得到幼芽；抗性苗培养阶段：将获得的幼芽转接到抗性苗培养基培养得到抗性苗；阳性苗检测阶段。本发明使用农杆菌介导观音莲转化，打通观音莲农杆菌介导高效转染体系，这是通过农杆菌转染体系培育新型观音莲最为重要的一步。本发明能够突破观音莲自身遗传屏障，获得难以通过传统育种方式生产的新品种。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 建立 杆菌 观音 高效 转染 体系 方法 | ||
【主权项】：
1.一种建立农杆菌介导观音莲转染体系的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n侵染和共培养阶段：将观音莲无菌苗叶片切成小块放入三角瓶中，加入菌液，瓶口密封，真空条件下侵染，侵染后倒去菌液，将叶片晾干，转接到共培养培养基中进行共培养；/n所述共培养培养基为：SH基础配方+2,4-D 0.20~0.30 mg•L
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