[发明专利]一种BBTV两个DNA2组分的鉴定方法和应用有效
| 申请号： | 201610499328.1 | 申请日： | 2016-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN106119412B | 公开（公告）日： | 2019-08-23 |
| 发明（设计）人： | 余乃通;刘志昕;熊忠国;周朋;王健华;张雨良;张秀春 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;陈欢 |
| 地址： | 571101 海南*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种BBTV两个DNA2组分的鉴定方法，包括：1)取感染BBTV的香蕉待测样品，提取总DNA，PCR扩增；2)将PCR产物连接至质粒载体，提取质粒并对质粒进行NdeI酶切；电泳检测，判定待测样品是否有2种DNA2组分；3)将步骤(2)中可被切成两条条带的质粒为模板进行PCR扩增，XhoII酶切；琼脂糖凝胶电泳检测，根据酶切条带，判定DNA2是否发生重组及重组率为多少。本发明提供的技术方案可鉴定香蕉束顶病毒(BBTV)分离物中是否含有两个DNA2组分、两个DNA2组分是否发生重组，以及发生重组后如何计算其重组率的方法，从而为对BBTV的进一步深入研究及病毒预防和控制奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 bbtv 两个 dna2 组分 鉴定 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种BBTV两个DNA2组分的鉴定方法，其特征在于，包括：1)取感染BBTV的香蕉待测样品，提取总DNA，在环状DNA2的307～325bp和289～307bp处分别设计上下游引物对，PCR扩增出DNA2；2)将步骤(1)所扩增的PCR产物连接至质粒载体，提取质粒并对质粒进行NdeI酶切；琼脂糖凝胶电泳检测，根据酶切条带，判定待测样品是否有2种DNA2组分；3)将步骤(2)中可被切成两条条带的质粒为模板，利用载体上的引物对进行PCR扩增，并对扩增产物进行XhoII酶切；琼脂糖凝胶电泳检测，根据酶切条带，判定DNA2是否发生重组及重组率为多少。
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