[发明专利]一种去除因原核包涵体表达变复性产生的多聚体的方法在审
申请号: | 201610497891.5 | 申请日: | 2016-06-29 |
公开(公告)号: | CN106119320A | 公开(公告)日: | 2016-11-16 |
发明(设计)人: | 彭延杰;庞广礼;曹强庚;林童俊;李锋;梁邦领 | 申请(专利权)人: | 山东省生物制品研究所 |
主分类号: | C12P21/00 | 分类号: | C12P21/00;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/14;C12R1/19 |
代理公司: | 济南舜昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 37249 | 代理人: | 侯绪军 |
地址: | 271000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明属于生物技术领域,具体为一种去除因原核包涵体表达变复性产生的多聚体的方法。本发明在蛋白复性液中加入硫酸铵,使多聚体在盐析作用下发生聚沉,再通过离心的方法使其从体系中分离出来,从而得到成分较为单一的复性液。通过此优化工艺,可有效提高最终目的蛋白回收率,并显著降低下游工艺对设备及耗材等的消耗,另外,可节省部分精制工艺,从而在提高生产效率同时有效降低生产成本。 | ||
搜索关键词: | 一种 去除 包涵 体表 复性 产生 多聚体 方法 | ||
【主权项】:
一种去除因原核包涵体表达变复性产生的多聚体的方法,其特征在于包括以下步骤:菌种活化和发酵培养:将菌株进行活化培养,然后进行放大诱导发酵培养,收集发酵液中的菌体细胞,利用超声破碎法获得表达出的包涵体;包涵体变复性:向包涵体中加入变性液进行变性,离心收集变性完全的变性蛋白溶液,然后将收集到的变性蛋白溶液加入复性液中进行复性;硫酸铵沉淀:复性结束后,向复性液中添加硫酸铵固体,然后将复性液离心,收集上清液,得到去除多聚体后的复性蛋白溶液;蛋白精制:根据工艺要求,进行纯化工艺,最终获得目的蛋白制品。
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