[发明专利]一种可同时实现苦丁茶中18个组份的含量分析和相似度评价的质量控制方法

摘要

本发明公开了一种可同时实现苦丁茶中18个组份的含量分析和相似度评价的质量控制方法。以芦丁、异绿原酸A和苦丁冬青甙A为内参物，计算芦丁对6‑羟基‑7,7a‑二氢‑2（6H）‑苯并呋喃、羟基酪醇葡萄糖苷，异绿原酸A对原儿茶酸、苦丁冬青甙E、苦丁冬青甙D、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸C，及苦丁冬青甙A对大叶冬青苷G、苦丁冬青甙G、苦丁茶冬青苷T和大叶冬青苷H的校正因子，作为常数用于含量测定，仅需3种常见对照品即可同时测定苦丁茶中18种成分的含量，快速、经济、科学的控制苦丁茶的质量，进一步可利用18种成分含量进行药材的聚类分析、主成份分析和相似度计算，全面控制苦丁茶质量。

主权项

1.一种苦丁茶检测方法，其特征在于，以芦丁、苦丁冬青甙A、异绿原酸A为内参物，以对6‑羟基‑7,7a‑二氢‑2（6H）‑苯并呋喃、羟基酪醇葡萄糖苷、原儿茶酸、苦丁冬青甙E、苦丁冬青甙D、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸C、大叶冬青苷G、苦丁冬青甙G、苦丁茶冬青苷T和大叶冬青苷H为指标性成分，检测分析苦丁茶中这些指标性成分的含量和相似度，具体检测分析的方法包括如下步骤：S1.色谱条件：色谱柱：Phenomenex Synergi Hydro‑RPC18 columns，4.6mm×250mm, 5μm；柱温：30℃；检测波长：210nm，260nm，326nm；流速：1.0ml/min；进样量：20μl；流动相：A为0.05% 磷酸‑H2O，B为乙腈，C为甲醇；按下面进行梯度洗脱：时间0.0 min，A相94%，B相6%；时间5min，A相94%，B相6%；时间15min，A相88%，B相12%；时间25min，A相84%，B相16%；时间26min，A相77%，B相20%，C相3%；时间45min，A相77%，B相20%，C相3%；时间50min，A相74%，B相26%；时间70min，A相74%，B相26%；时间85min，A相71%，B相29%；时间110min，A相54%，B相46%；时间110.01min，A相10%，B相90%；时间120min，A相10%，B相90%；S2.对照品溶液的制备：称取芦丁、异绿原酸A和苦丁冬青甙A标准品适量，精密称定，用甲醇溶解并稀释成含芦丁、异绿原酸A 和苦丁冬青甙A的混合对照品溶液，绘制标准曲线；S3.供试品溶液的制备：精密称定苦丁茶细粉，甲醇室温浸渍后冰浴超声提取，0.45μm滤过，即得供试品溶液；S4.成分含量计算：进样供试品溶液，记录苦丁茶中18个组分在相应波长处的峰面积，用标准曲线计算出三个内参物的浓度，再结合相对校正因子RCFx按下式即可计算出其他15种组分的浓度，继而计算出其在苦丁茶中的含量：待测组分的浓度由下式计算得出：其中，Ax为内参物对照品峰面积，Ai为待测成分对照品峰面积；Ci为待测成分对照品浓度；每个组分所对应的RCFx分别为：6‑羟基‑7,7a‑二氢‑2（6H）‑苯并呋喃      3.194羟基酪醇葡萄糖苷                     1.68原儿茶酸                             1.57新绿原酸                             0.775绿原酸                               0.836隐绿原酸                             0.709咖啡酸                               1.753异绿原酸B                            1.731异绿原酸C                            1.28大叶冬青苷G                          0.423苦丁冬青甙G                          0.137苦丁冬青甙E                          1.039苦丁冬青甙D                          1.066苦丁茶冬青苷T                        0.635大叶冬青苷H                          0.349。