[发明专利]一种抗体修饰纳米微球电泳流动型ELISA的方法有效
| 申请号： | 201610476330.7 | 申请日： | 2016-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN105891306B | 公开（公告）日： | 2019-04-26 |
| 发明（设计）人： | 申鹤云;张芳芳 | 申请（专利权）人： | 北京化工大学 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447;G01N33/53 |
| 代理公司： | 北京思海天达知识产权代理有限公司 11203 | 代理人： | 张慧 |
| 地址： | 100029 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 一种抗体修饰纳米微球电泳流动型ELISA的方法，属于生物材料领域。第一抗体吸附在多孔膜表面，再进行封闭剂蛋白吸附；抗原‑第一抗体反应；电泳驱动抗体修饰纳米微球，进行第二抗体‑抗原反应，对酶标第二抗体进行显色定量：电泳驱动第二抗体‑抗原反应后，将多孔膜清洗，所得多孔膜基片放入第二抗体标识酶的底物溶液中，进行显色；通过检测吸光度，进行抗原定量分析。采用正电性PDDA/PSS修饰醋酸纤维素膜PEMs‑CA，羧基聚苯乙烯纳米微球为酶标第二抗体修饰的载体。PEMs修饰降低了非特异性吸附，抗体修饰纳米微球起到信号放大的作用，电泳驱动力使第二抗体短时间内局部浓缩到抗原周围，实现了快速灵敏的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 抗体 修饰 纳米 电泳 流动 elisa 方法 | ||
【主权项】：
1.一种抗体修饰纳米微球电泳流动型ELISA的方法，其特征在于，(1)将第一抗体吸附到聚电解质修饰的多孔膜基片上；(2)吸附第一抗体的多孔膜基片再进行封闭剂蛋白吸附；(3)抗原‑第一抗体反应：将步骤(2)第一抗体和封闭剂蛋白吸附后的多孔膜基片加入到抗原溶液中，进行抗原‑第一抗体反应；(4)电泳驱动NP‑Ab‑抗原反应：将步骤(3)抗原‑第一抗体反应后的多孔膜基片固定在电泳装置中，在电泳装置中所述的多孔膜基片一侧注入抗体修饰纳米微球磷酸盐缓冲液即电泳溶液，插入负电极，多孔膜基片另一侧注入磷酸盐缓冲溶液，插入正电极；正电极和负电极加电压，进行抗原‑第二抗体反应；(5)对酶标第二抗体进行显色定量：将步骤(4)电泳驱动抗体修饰纳米微球‑抗原反应后的多孔膜基片放入到第二抗体标识酶的底物溶液中，进行显色；通过检测吸光度，进行抗原定量分析。
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