[发明专利]神经移植物的制备方法及其产品

摘要

本发明公开了一种神经移植物的制备方法及其产品，制备方法包括如下步骤：猪神经组织提取、去除与神经组织相连的脂肪组织和结缔组织、液氮冻融、化学洗涤和消毒灭菌。本发明将冻融和化学洗涤两种方法相结合，改善了神经组织骨架的结构完整性，猪神经组织中细胞成分去除彻底，降低了免疫性，本发明制得的神经移植物产品可以达到神经快速生长、功能恢复的目标，为临床治疗提供了可行方案。

主权项

1.神经移植物的制备方法，以猪的神经组织为原料，包括冻融和化学洗涤过程，其特征在于包括如下步骤：/n1）、猪神经组织提取/n从6~12个月的猪提取坐骨神经、胫神经和腓总神经组织，神经组织长度为10~30cm、直径为2~6mm；/n2）、去除与神经组织相连的脂肪组织和结缔组织/n使用磷酸钠盐缓冲液冲洗3~8次，置于磷酸钠盐缓冲液中，-80℃冰箱保存备用；/n3）、液氮冻融/n将步骤2）的神经组织于室温下使用蒸馏水冲洗，置液氮中1~10min后，再水浴融化，重复1~5遍；/n4）、化学洗涤/n将步骤3）液氮冻融处理后的神经组织于室温下使用蒸馏水冲洗，再分别使用下述溶液A、B、C和D进行冲洗：/n溶液A：磷酸钠缓冲液，含100mM硫代甜菜碱；/n溶液B：磷酸钠缓冲液，pH为7.2～7.4；/n溶液C：磷酸钠缓冲液，含1mM硫代甜菜碱、0.1%曲拉通x-200；/n溶液D：磷酸钠缓冲液，每毫升含软骨素酶 ABC 2单位；/n5）、消毒灭菌/n以伽马射线进行消毒灭菌，于溶液B中-70℃冷冻保存；手术前于36℃水浴融化，然后置于溶液D孵育10~20小时；/n所述步骤4）的化学洗涤包括如下步骤：/n将步骤3）液氮冻融处理后的神经组织于室温下使用蒸馏水冲洗后，置于溶液A中，振荡冲洗5~20小时；/n再置于溶液B中，振荡冲洗10~30分钟；/n置于溶液C中，振荡冲洗12~36小时；/n再置于溶液B中，振荡冲洗1~10分钟，重复2~4次；/n置于溶液A中，振荡冲洗5~20小时；/n置于溶液B中，振荡冲洗10~30分钟；/n置于溶液C中，振荡冲洗10~24小时；/n最后置于溶液B中，振荡冲洗1~10分钟，重复2~4次。/n