[发明专利]苦参的良种培育方法

摘要

本发明公开了一种苦参的良种培育方法，涉及中药材人工种植技术领域。茎尖和根尖的分生组织中一般是无毒或仅含极低浓度的病毒粒子，利用细胞的全能性，通过茎尖或者根尖分裂分化可产生完整的、无病毒的植株。本发明不仅是通过茎尖培养的方式，还提出了根尖培养的方式，获得优良无病毒的苦参幼苗，将其进行种植，植株生长健壮，长势一致，病虫害发生率只有8%左右，远远低于普通无性繁殖35%左右的病虫害发生率，解决了苦参由于长期无性繁殖引起的病毒累积严重的问题。

主权项

一种苦参的良种培育方法，其特征在于包括如下步骤：A、植株筛选：在苦参成熟时或者萌芽时，选择无病虫害的植株；B、预处理和消毒：取步骤A所得植株的根尖或者子芽1～2cm，用清水清洗干净，再用70%的酒精漂洗30s，然后用0.1%的HgCl2溶液灭菌3min，无菌水洗3遍及以上；C、将步骤B所得的子芽置于显微镜下，用酒精浸泡后，再用灼烧冷却的镊子和剪刀剥离子芽外部叶片，切取带有1～2个叶原基的茎尖；或者将步骤B所得的根尖置于显微镜下，用酒精浸泡后，再用灼烧冷却的镊子和剪刀将根尖分生区细胞切成3～7个根尖小段，再用无菌水清洗3遍及以上；D、培育：将步骤C所得茎尖放入诱导培养基中进行培养，所述诱导培养基是MS+6‑苄基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.0mg/L，等到生长出不定芽后，继续在所述诱导培养基中培养35～40天，至生长出3～4 cm丛生芽，将所述丛生芽剪成2片叶，长约1.5 cm的小段接入增殖培养基，所述增殖培养基是MS全培养基，20天为一个转接周期，当增殖至适当的数量后，将幼苗分25～30株为一批，分批接入生根培养基中，所述生根培养基是1/2MS+萘乙酸1.0mg/L+多效唑 10mg/L，培养至有白色根系长出；或者将步骤C所得根尖小段放入诱导培养基中进行培养15～25天，所述诱导培养基是MS+6‑苄基嘌呤1.5mg/L +萘乙酸1.0mg/L，得到预生根，将所述预生根的根尖1～2cm切成3～7个根尖小段接入所述诱导培养基培养15～25天，重复上述步骤至得到适当数量的预生根后，将所述预生根25～30个为一批，分批接入增殖培养基，所述增殖培养基是MS+6‑苄基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.5mg/L，培养至长出3～4 cm丛生芽；E、将步骤D所得长叶长根的幼苗放入阳光下3～5天，取出幼苗，将其移栽至育苗床，行距5～6cm、株距5～6cm，开深3～4cm，每处栽种一株幼苗，保持育苗床湿润；所述育苗床是由甘蔗叶作为基质，混合有蔗糖厂滤泥和/或者鱼塘淤泥、磷酸氢二钾、花生麸、腐殖质发酵而得；当幼苗长出6～7片复叶，60%植株出现五出复叶时，将其移栽至大田，即可。