[发明专利]一种测定血浆中8-表黄独素E乙酸酯浓度的方法有效
| 申请号： | 201610460967.7 | 申请日： | 2016-06-22 |
| 公开（公告）号： | CN106153766B | 公开（公告）日： | 2018-08-31 |
| 发明（设计）人： | 戴国梁;张农山;刘史佳;居文政;吴磊;张倩;李长印 | 申请（专利权）人： | 江苏省中医院 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 黄天天 |
| 地址： | 210029 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种测定血浆中8‑表黄独素E乙酸酯浓度的方法，采用液质联用系统测定，先取待测样品，加入一定量的有机溶媒蛋白沉淀剂进行蛋白沉淀，预处理后，经色谱柱分离，用质谱检测器检测，本发明方法快速、准确、灵敏度高、操作简便，适合于测定血浆中8‑表黄独素E乙酸酯的浓度。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 测定 血浆 表黄独素 乙酸 浓度 方法 | ||
【主权项】：
1.一种测定血浆中8‑表黄独素E乙酸酯浓度的方法，其特征在于，血浆样品经预处理后经液质联用系统检测其浓度，具体方法包括如下步骤：（1）血浆样品预处理：取血浆样品，加入内标替硝唑甲醇溶液，加入甲醇或乙腈进行蛋白沉淀，离心后取上清液；（2）将步骤（1）预处理后的血浆样品进行液相色谱分离：色谱条件中色谱柱为Phenomenex Gemini C18柱；流动相：体积比为70:30的甲醇与0.1%甲酸水溶液；流速：0.2‑0.5 mL·min‑1；柱温：30‑40 ℃；进样量：5 μL；洗脱方式为等度洗脱；（3）质谱测定，条件为：离子源：电喷雾离子化电离源ESI；离子检测方式：多反应监测MRM；离子极性：正离子；毛细管电压：4000 V；干燥气温度：400 ℃；脱溶剂气和锥孔气均为高纯氮气；检测对象的离子通道：8‑表黄独素E乙酸酯，[M‑Na]+，m/z 411.1→351.0，驻留时间100，碎裂电压 150，碰撞能量 25；内标替硝唑，[M‑H]+，m/z 248.2→121.0，驻留时间100，碎裂电压110，碰撞能量 10；（4）计算：采用内标法，以8‑表黄独素E乙酸酯和内标替硝唑的峰面积比值代入标准曲线方程计算8‑表黄独素E乙酸酯的浓度。
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