[发明专利]一种液基细胞制片方法有效
申请号: | 201610458798.3 | 申请日: | 2016-06-22 |
公开(公告)号: | CN106124266B | 公开(公告)日: | 2019-10-18 |
发明(设计)人: | 毛立新;陈志俊;王云皓;项伟平 | 申请(专利权)人: | 杭州海世嘉生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30 |
代理公司: | 北京维正专利代理有限公司 11508 | 代理人: | 郑兴旺 |
地址: | 310030 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种液基细胞制片方法,其包括如下步骤:步骤1,取细胞涂片器,且该细胞涂片器包括托盘、固定在托盘上的制片仓、位于制片仓下端面且封堵制片仓下端的载玻片、可拆设在制片仓内并沿制片仓周向设置的过滤膜、置于制片仓内且位于过滤膜上方的过滤腔和置于制片仓内且位于过滤膜下方的清洗腔;于制片仓内加入清洗液,清洗液全部进入清洗腔且其液面与过滤膜齐平。步骤2,取样本和保存液的混合物加至过滤腔内,混合物经过滤膜进入清洗腔内,细胞沉降至清洗腔底部;步骤3,除去过滤膜及过滤膜上的杂质,自然沉降除上清液;加清洗液,离心,弃上清液;步骤4,抽取载玻片,固定、染色、封片,具有减少细胞损失的效果。 | ||
搜索关键词: | 一种 细胞 制片 方法 | ||
【主权项】:
1.一种液基细胞制片方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1,在20~30℃、81~122kPa的常温常压下,取细胞涂片器,且该细胞涂片器包括托盘(1)、固定在托盘(1)上的制片仓(2)、位于制片仓(2)下端面且封堵制片仓(2)下端的载玻片(3)、可拆设在制片仓(2)内并沿制片仓(2)周向设置的过滤膜(7)、置于制片仓(2)内且位于过滤膜(7)上方的过滤腔(8)和置于制片仓(2)内且位于过滤膜(7)下方的清洗腔(9);于制片仓(2)内加入清洗液,清洗液全部进入清洗腔(9)内,清洗液全部进入清洗腔(9)内后其液面与过滤膜(7)的高度齐平;步骤2,取样本和保存液的混合物,将其加至经步骤1处理后的细胞涂片器的过滤腔(8)内,样本和保存液的混合物经过滤膜(7)进入清洗腔(9)内,样本内的细胞沉降至清洗腔(9)底部;步骤3,除去经步骤2处理后的过滤膜(7)及过滤膜(7)上的杂质,自然沉降后除去上层清液,自然沉降时间为0.5~1hr;步骤4,取经步骤3处理的细胞涂片器,抽取其上的载玻片(3),固定、染色、封片,即得;所述的清洗液用定量的NaCl、甘油、无水乙醇或/和双蒸水经混合、搅拌、过滤,取滤液制成;所述的保存液制备方法包括: 步骤A:取定量的KCl、KH2PO4、Na2HPO4和双蒸水混合并搅拌均匀; 步骤B:取定量的乙二醇和异丙醇混合并搅拌均匀; 步骤C:于步骤A得到的混合溶液中加入定量的EDTA‑2Na和步骤B得到的乙二醇/异丙醇混合物,混合并搅拌均匀; 步骤D:于步骤C得到的混合溶液中加入定量的甲醛,混合并搅拌均匀,即得。
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